姜黃素抑制NF-κB活化過(guò)程對(duì)顆粒誘導(dǎo)骨溶解影響的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過(guò)探討姜黃素對(duì)NF-κB活化過(guò)程的影響，研究姜黃素對(duì)聚乙烯顆粒誘導(dǎo)骨溶解的治療效果及作用機(jī)制，為預(yù)防和治療人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后假體無(wú)菌性松動(dòng)提供新思路。
　　方法：隨機(jī)選取30只4周大雄性BALB/c小鼠并建立背部氣囊，一周后隨機(jī)殺死其中10只并取其顱骨片，植入其它小鼠背部氣囊，建立小鼠氣囊植骨模型。動(dòng)物模型建立后分為以下4組：空白組（A組）、聚乙烯組（B組）、溶劑組（C組）、姜黃素組（D組）。建模后第一天向空白組氣囊內(nèi)注射1

2、ml生理鹽水，其余三組小鼠氣囊內(nèi)注射等量聚乙烯顆粒懸濁液。用DMSO溶解姜黃素，并以玉米油定容，制備濃度為5mg/ml的姜黃素溶液，同時(shí)制作不含姜黃素的相同成分溶劑。建模后第2天開(kāi)始，每天向姜黃素組氣囊內(nèi)注射0.2ml姜黃素溶液（姜黃素用量為50mg/kg/d），向溶劑組氣囊內(nèi)注射等量溶劑，其余兩組注射等量生理鹽水。21天后處死所有小鼠，取出背部氣囊及骨片。行TRAP染色檢測(cè)骨片中破骨細(xì)胞的數(shù)量。液氮碾磨法處理氣囊組織，分別提取總RNA

3、和總蛋白，QPCR檢測(cè)c-FOS、NFATc1的mRNA表達(dá)水平，行western blot檢測(cè)氣囊組織中IκBα以及p-IκBα的蛋白含量。
　　結(jié)果：TRAP染色發(fā)現(xiàn)，在聚乙烯組和溶劑組骨片中染色的破骨細(xì)胞較多，而空白組和姜黃素組極少或沒(méi)有染色的破骨細(xì)胞。QPCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，基因表達(dá)情況：c-FOS：聚乙烯組>溶劑組>空白組>姜黃素組,前兩組與后兩組相比，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;
　　NFATc1：聚乙烯組>

4、溶劑組>空白組>姜黃素組，前兩組與后兩組相比，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，IκBα蛋白相對(duì)灰度值：姜黃素組>空白組>溶劑組>聚乙烯組,前兩組與后兩組相比，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；p-IκBα蛋白相對(duì)灰度值:聚乙烯組>溶劑組>空白組>姜黃素組，前兩組與后兩組相比，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　結(jié)論：在小鼠氣囊植骨模型中，姜黃素可以通過(guò)抑制NF-κB的活化以及c-