黑腹果蠅黑條體突變型條紋基因（stripe）的克隆與定位.pdf

1、黑腹果蠅新的突變體是研究生物體復雜性狀良好的實驗材料。本實驗室黑腹果蠅 (Drosophial melanogaster)自發(fā)突變體在體色表型上分化出深黑色和褐體色，在背甲上表現出明顯不同數量(0、1、3、5)的縱向黑條紋，各體色和條紋品系自交，后代中仍然有極少交叉性狀的出現。目前，體色突變基因的定位和序列測定工作已經完成，本研究的主要目的在于探討和確定條紋突變基因的定位和克隆。已知stripe基因的突變體表型與本研究對象的表型相似，故

2、首先對條紋突變體的stripe基因進行克隆，然后利用常規(guī)雜交對條紋突變基因定位。由于srtipe基因過長，不易對其全序列測定，只對外顯子序列進行測定。根據果蠅stripe基因的序列設計了一系列特異性引物，對黑條體突變型的stripe基因進行克隆和序列測定，結果發(fā)現黑條體在3’端不表達，與已公布的stripe基因序列相比，910910的cDNA缺失了60bp，換用果蠅總DNA為模版擴增后測序，突變體的stripe基因序列沒有任何差別，91

3、0910的DNA序列和cDNA一致。同時測定了全國其他13個地方的野生型果蠅的stripe基因的3’端，結果與已公布的序列相同。常規(guī)雜交選用位于第一染色體上的黃體基因(yellow)突變體、位于第二染色體上的褐體基因(brown)突變體和位于第三染色體上的條紋基因(stripe)突變體，對黑條體突變型的條紋基因的定位進行探討。雜交結果表明，條紋突變基因和vellow 以及 brown不在同一染色體上，符合自由組合規(guī)律。黑條體和條紋基因突

4、變體雜交，子一代有極少量沒有條紋的個體，子二代也有部分沒有條紋，進一步的雜交證明，黑條體分化的沒有條紋的個體與5條條紋的個體雜交，后代均有條紋，而野生型果蠅和5條條紋個體雜交，子一代均沒有條紋，說明黑條體和條紋基因突變體雜交的F1中的沒有條紋個體是黑條體所分化的0條個體。由此得出結論：910910是一種新的野生型品系，目前還不清楚910910和黑條體突變體有沒有直接的聯系；黑條體條紋突變基因就是位于第三染色體上的stripe基因，但st