木蘭科6屬20種植物的RAPD和ISSR分析.pdf

1、應(yīng)用RAPD和ISSR標記對木蘭科6屬20種植物的遺傳多態(tài)性和親緣關(guān)系進行分析，比較屬間、屬內(nèi)的遺傳差異，并結(jié)合前人的研究結(jié)果，對木蘭科6屬及屬下類群的系統(tǒng)位置進行探討，旨在為木蘭科植物的系統(tǒng)分類及其它研究提供實驗依據(jù)。 研究結(jié)果如下： (1)建立了適合于木蘭科6屬20種植物DNA提取的改良CTAB法I，用該法提取的DNA能滿足RAPD和ISSR分析的要求； (2)采用單因素結(jié)合均勻試驗設(shè)計優(yōu)化得到適合于木蘭科6

2、屬20種植物RAPD和ISSR分析的PCR體系。優(yōu)化的RAPD-PCR體系為：Mg<'2+>3.0 mmol/L、dNTP0.15 mmol/L、引物0.40μmol/L、模板DNA 20 ng/20μL、Taq DNA聚合酶1 U；優(yōu)化的ISSR-PCR體系為：Mg<'2+>1.00mmol/L、dNTP 0.20 mmol/L、引物0.40μmol/L、模板DNA 40 ng/20μL、Taq DNA聚合酶1 U； (3)分

3、別從112條RAPD引物和99條ISSR引物中篩選出14條RAPD引物和12條ISSR引物用于RAPD和ISSR分析。14條RAPD引物共檢測到287個位點，其中多態(tài)位點占99.30％，Nei′s基因多樣度為0.3591，Shannon信息指數(shù)為0.5334；12條ISSR引物共檢測到222個位點，且222個位點都是多態(tài)的，Nei′s基因多樣度為0.3477，Shannon信息指數(shù)為0.5218。RAPD和ISSR分析都表明木蘭科6屬2