霍山石斛內(nèi)生真菌的分離及其促生作用的研究.pdf

1、本文以國家重點保護(hù)的藥用植物霍山石斛(Dendrobium huoshanense C．Z．Tang etS．J．Cheng)為研究材料，采用常規(guī)內(nèi)生真菌的分離方法，以馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基為分離培養(yǎng)基，從霍山石斛的根部分離得到3株內(nèi)生真菌；通過與霍山石斛試管苗的共培養(yǎng)實驗，發(fā)現(xiàn)其中的1株內(nèi)生真菌(編號SH-01)對霍山石斛試管苗的生長有顯著的促進(jìn)作用；實驗就SH-01對霍山石斛試管苗生長的影響進(jìn)行了研究。 1．從85個石斛根段中，分

2、離得到3株內(nèi)生真菌，通過形態(tài)學(xué)觀察初步鑒定分別隸屬于半知菌亞門絲孢綱的枝頂孢霉屬和柱孢霉屬。 2．通過共培養(yǎng)，從分離得到的3株內(nèi)生真菌中，篩選出1株對霍山石斛試管苗生長有顯著促進(jìn)作用的內(nèi)生真菌(SH-01)，該菌株與霍山石斛試管苗共培養(yǎng)30d時，霍山石斛試管苗增重量是對照增重量的1.22倍，株高的增加量達(dá)到對照增加量的1.69倍。且多次重復(fù)實驗證明，SH-01對霍山石斛試管苗的生長有顯著的促進(jìn)作用。 3．研究了內(nèi)生真菌S

3、H-01的培養(yǎng)特性，并以菌絲體生物量為指標(biāo)對其培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化，綜合實驗結(jié)果和經(jīng)濟(jì)因素，篩選出SH-01的最佳培養(yǎng)條件為：200g/L馬鈴薯+10g/L蔗糖十5g/L蛋白胨+3g/L磷酸二氫鉀+1.5g/L硫酸鎂，pH6.0。 4．初步建立了內(nèi)生真菌與霍山石斛試管苗的共培養(yǎng)體系。共培養(yǎng)的最佳條件為1/2MS+10 g/L蔗糖+10g/L瓊脂，pH5.8。 5．研究了內(nèi)生真菌SH-01對霍山石斛試管苗生長的影響。結(jié)果表明，

4、在共培養(yǎng)30d和60d時，與內(nèi)生真菌SH-01共培養(yǎng)的霍山石斛試管苗的鮮重、株高的增加幅度均顯著高于對照(P<0.05)。且在促進(jìn)霍山石斛試管苗生長的同時，該內(nèi)生真菌對石斛主要有效成分石斛多糖和生物堿的積累并沒有影響。研究中還發(fā)現(xiàn)，共培養(yǎng)60d時，霍山石斛試管苗鮮重、株高和分蘗與對照相比的增加率都要低于共培養(yǎng)30d時鮮重、株高和分蘗的增加率，表明隨著共培養(yǎng)時間的增加，該內(nèi)生真菌對霍山石斛試管苗的促生作用減弱了。霍山石斛試管苗與內(nèi)生真菌S