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文檔簡介
1、許多細菌采用密度感應(yīng)(Quorum sensing,QS)的方式進行細胞間交流,QS是指細菌在生長過程中,根據(jù)細胞數(shù)量變化調(diào)控基因表達的一種密度依賴性行為。QS受到一種被稱為自誘導(dǎo)物的小信號分子調(diào)控,這種信號分子在細菌細胞內(nèi)合成并釋放到周圍環(huán)境中。隨著菌體細胞的數(shù)量的增加,自誘導(dǎo)物的胞外濃度也不斷上升。細菌的QS系統(tǒng)在協(xié)調(diào)細菌種群基因表達和功能性調(diào)控上起著至關(guān)重要的作用。研究發(fā)現(xiàn),在嗜酸性氧化硫硫桿菌(Acidithiobacillus
2、 thiooxidans,A.thiooxidans)中發(fā)現(xiàn)了密度感應(yīng)系統(tǒng),它能產(chǎn)生AHL信號分子,它的QS系統(tǒng)有可能參與調(diào)控了其對于礦物的吸附作用。然而目前對其所具有的功能還知之甚少。
本文對分離得到的A.thiooxidans進行初步的生理生化研究,結(jié)果顯示,該菌為革蘭氏陰性菌,它通過氧化培養(yǎng)基中的硫單質(zhì)獲得生長所需的能量,硫單質(zhì)被氧化成硫酸并釋放出H+,使得菌液中的pH值在不斷的下降,由最初的3.2左右下降到1.0以下。
3、最后,菌液pH值不再下降,說明A.thiooxidans已經(jīng)把培養(yǎng)基中的硫幾乎氧化完全。
?;呓z氨酸內(nèi)脂(acylated homoserine lactone,AHL)是革蘭氏陰性菌產(chǎn)生的特征性信號分子,指示平板法是目前檢測AHL信號分子的一種最簡便的方法。本實驗用Agrobacterium tumefaciens NTL4(pZLR4)作為指示細菌,制作指示平板,檢測了A.thiooxidans培養(yǎng)液中的提取物,實驗結(jié)果
4、顯示A.thiooxidans能產(chǎn)生AHL信號分子,證明了氧化硫硫桿菌存在LuxR/I型信號系統(tǒng)。
在本實驗室現(xiàn)有研究的基礎(chǔ)上,合成了三種AHL結(jié)構(gòu)類似物和溴化呋喃酮(furanone C-30),并通過核磁共振氫譜、核磁共振碳譜和ESI-MS確定了這些化合物的結(jié)構(gòu)。然后用合成的化合物作用于A.thiooxidans的QS系統(tǒng),發(fā)現(xiàn)這四種化合物均能抑制A.thiooxidans生物膜的形成。合成的化合物可以通過抑制A.thio
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