大葉鐵線蓮全草中的化學成分研究.pdf

1、毛茛科鐵線蓮屬植物應用廣泛，主要用于祛風除濕、解毒消腫。藥理研究表明本屬植物具有抗炎、抗腫瘤的作用。本屬植物大葉鐵線蓮主要分布于我國的陜西、江蘇、山東、河北、湖南、湖北等地區(qū)，常見于山坡溝谷、林邊及路旁的灌叢中，資源豐富。迄今為止，其化學成分未見報道。本課題首次對大葉鐵線蓮的全草進行化學成分及初步藥理活性的研究，以期獲得結(jié)構(gòu)新穎且活性好的化合物，為大葉鐵線蓮的應用及研究提供理論基礎和依據(jù)。
　　本課題采用75％的乙醇提取，利用正反

2、相硅膠柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜、半制備高效液相色譜等分離方法從全草中得到單體化合物，根據(jù)其理化性質(zhì)和波譜技術鑒定化學結(jié)構(gòu)；采用堿水解并分離獲得次生產(chǎn)物(次級苷)。共鑒定了27個單體化合物，其中，從正丁醇層萃取部位分離并鑒定了22個化合物，分別為：木栓酮(1)，表木栓醇(2)，β-谷甾醇(3)，金絲桃苷(4)，異葒草素(5)，刺楸皂苷G(6)，紅毛七皂苷D(7)，yemHOSide YM32(8)，huzhangos

3、ide B(9)，clematiganosideA(10)，hlazhangoside c(11)，flaccidoside II(12)，3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(13)，刺楸皂苷B(14)，clemargenoside B(15)，刺五加苷A1(16)，3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-

4、28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(17)，3-O-β-D-吡喃木糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(18)，3β-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-齊墩果-18-烯-28-酸-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-

5、D-吡喃葡萄糖苷(19)，3β-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果-18-烯-28-酸-O—α—L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(20)，3β-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果-18-烯-28-酸-O-α—L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(21)和3β，23-二羥基-齊墩果-18-烯-28-酸-O-α-L-吡喃鼠

6、李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(22)。把化合物7、9、19、20和2l經(jīng)過堿水解得到的產(chǎn)物分別是：3—O-α-L-吡喃阿拉伯糖．常春藤苷(7a)，saponin CP4(9a)，3β-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-黃蓮木酸苷(19a)，3β-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-黃蓮木酸苷(20a)和3β-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-α-L-吡喃阿拉伯糖-黃蓮木酸苷(21a

7、)。所有化合物均從該植物中首次得到，其中皂苷19～22是新化合物，分別命名為大葉鐵線蓮皂苷A(19)、大葉鐵線蓮皂苷B(20)、大葉鐵線蓮皂苷C(21)和大葉鐵線蓮皂苷D(22)，化合物19a、20a和21a是新的人工產(chǎn)物，化合物8是從本屬植物中首次得到。
　　將9個原生皂苷和5個經(jīng)堿水解獲得的次級皂苷用MTT法進行抗腫瘤活性的篩選，采用阿霉素為陽性對照，發(fā)現(xiàn)5個28位羧基游離的單糖鏈次級苷7a、9a、19a、20a和21a對乳腺

8、癌MDA—MB-231細胞有不同程度的細胞毒性，其中9a的細胞毒性最為顯著，且9a對胃癌SGC-7901細胞的毒性也很突出，同時還發(fā)現(xiàn)次級苷7a、9a、19a、20a和21a對MDA—MB-231細胞的毒性強于SGC-7901細胞，而9個雙糖鏈原生苷和1個3位羥基游離的單糖鏈皂苷均無活性。結(jié)果表明：齊墩果烷型三萜皂苷具有腫瘤細胞毒性的必要條件之-是28位羧基游離的單糖鏈結(jié)構(gòu)。這進-步驗證了文獻中對該類型皂苷構(gòu)效關系的報道。研究提示：對于

9、主要含雙糖鏈三萜皂苷的中草藥提取物，通過簡單的堿水解方式制備具有抗腫瘤作用的制劑可能會是-條可行的途徑。
　　課題創(chuàng)新性及研究意義：
　　1．首次對大葉鐵線蓮全草的化學成分進行了比較系統(tǒng)的研究，鑒定了27個單體化合物，其中齊墩果烷型皂苷22個(包括5個次級苷)、木栓烷型三萜2個、黃酮苷2個、植物甾醇1個，初步對其化學成分有了認識。
　　2．化學新穎性：發(fā)現(xiàn)了4個新化合物，它們苷元的雙鍵位于18(19)位，在本屬植物中比

10、較罕見，且其中-個化合物(21)的3位糖鏈連接順序在該屬植物皂苷中首次發(fā)現(xiàn)；另有1種化合物從該屬植物中首次獲得；所有化合物均從該植物中首次分離得到。另外，通過對部分化合物的堿水解得到5個次級皂苷，其中3個為新的人工產(chǎn)物。
　　3．對部分單體化合物進行腫瘤細胞毒活性篩選，初步討論了受試樣品的構(gòu)效關系，并提出將以雙糖鏈三萜皂苷為主要成分的樣品通過堿水解方式開發(fā)為抗癌新藥的思路。
　　4．本課題為合理利用大葉鐵線蓮的藥用資源提供了