膠原-殼聚糖-穿膜肽凝膠的制備及其效應(yīng)的研究.pdf

1、背景：
　　膠原蛋白是細(xì)胞外基質(zhì)的重要組分之一。其富有機(jī)體所需的甘氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸，生物相容性好，可降解，低抗原活性，對(duì)組織的愈合起著重要作用。膠原蛋白的運(yùn)用遍及食品、醫(yī)藥等很多行業(yè)。尤其是在醫(yī)用材料和遞藥方面，膠原蛋白具有很好的應(yīng)用前景。特別是魚類膠原蛋白具有來源廣泛，處理相對(duì)方便等優(yōu)點(diǎn)而受到廣泛的關(guān)注。
　　殼聚糖來源于甲殼素，資源極其豐富。它不但沒有毒性，而且相容性好。殼聚糖可以抗菌，止血，促進(jìn)組織修復(fù)與傷口愈合

2、。其在醫(yī)用敷料與遞藥領(lǐng)域的應(yīng)用成為研究的熱點(diǎn)。
　　細(xì)胞穿膜肽又被稱為蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)結(jié)構(gòu)域，可分為陽離子型和兩親型。它是可以將大分子帶入細(xì)胞的短肽。因?yàn)樗鼈儶?dú)特的轉(zhuǎn)運(yùn)方式，也有人稱之為特洛伊木馬肽。它可以攜帶各種大分子穿越生物膜與血腦屏障。其在炎癥、腫瘤、缺血性和腦疾病的治療，疫苗領(lǐng)域，生物活性物質(zhì)遞送方面等都有應(yīng)用。
　　目的：
　　研發(fā)新型膠原/殼聚糖/穿膜肽復(fù)合凝膠。通過特殊的物理交聯(lián)法成功制備膠原/殼聚糖/穿膜肽凝膠

3、，并且對(duì)其進(jìn)行了理化分析和相關(guān)特性的評(píng)估。最后分析了該凝膠的體外活性與在體效應(yīng)。
　　方法：
　　1.制備表征與理化分析:采用物理交聯(lián)法以殼聚糖、膠原、穿膜肽為材料，β-甘油磷酸鈉為引發(fā)劑，成功制備了膠原/殼聚糖/穿膜肽復(fù)合凝膠。然后用掃描電鏡、紅外、差示等對(duì)其進(jìn)行了分析。并且對(duì)不同凝膠的PH、凝膠時(shí)間、滲透壓、溶脹率等進(jìn)行了評(píng)估。
　　2.體外活性分析:選用L929成纖維細(xì)胞來研究復(fù)合材料的細(xì)胞毒性。然后選取金黃色葡

4、萄球菌來分析不同材料的抑菌情況。
　　3.在體效應(yīng)研究:用小鼠表皮創(chuàng)傷模型，研究不同凝膠對(duì)ICR小鼠表皮組織愈合的效應(yīng)。試驗(yàn)包括小鼠表皮創(chuàng)傷模型的制備與給藥、創(chuàng)傷恢復(fù)狀態(tài)的考察、愈合率的分析、創(chuàng)面蛋白含量的測(cè)定、組織切片HE染色等。
　　結(jié)果：
　　1.差示、差熱分析、紅外分析等結(jié)果都共同證明了本課題組的殼聚糖凝膠、膠原/殼聚糖凝膠和膠原/殼聚糖/穿膜肽凝膠都制備成功。PH、凝膠時(shí)間、滲透壓、溶脹率等結(jié)果表明膠原/殼聚

5、糖/穿膜肽凝膠具備作為醫(yī)用敷料的優(yōu)良特性。
　　2.細(xì)胞毒試驗(yàn)結(jié)果表明制備的各種凝膠基本沒有細(xì)胞毒性，完全符合醫(yī)用材料的標(biāo)準(zhǔn)。抑菌性試驗(yàn)結(jié)果表明膠原/殼聚糖/穿膜肽組的抑菌作用強(qiáng)于殼聚糖與膠原殼聚糖組。
　　3.小鼠在體試驗(yàn)結(jié)果表明膠原/殼聚糖/穿膜肽凝膠組的愈合率最高，愈合最快，創(chuàng)面蛋白含量最高，組織切片觀察到的愈合效果更好，這些說明其比殼聚糖凝膠和膠原殼聚糖凝膠更能有效的促進(jìn)小鼠表皮創(chuàng)傷的愈合。
　　結(jié)論：