脂聯(lián)素介導(dǎo)的脂肪積累調(diào)控研究.pdf

1、脂肪組織是生物體內(nèi)最大的儲(chǔ)能組織，而且也是十分活躍的脂肪代謝的主要器官。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，脂肪組織作為一個(gè)十分重要的內(nèi)分泌器官，能夠分泌許多細(xì)胞因子和細(xì)胞因子樣分子，如：瘦素（leptin）、脂聯(lián)素（adiponecan）、抵抗素（resistin）等脂肪細(xì)胞因子（adipocytokines）。這些脂肪細(xì)胞因子通過內(nèi)分泌或旁分泌方式對(duì)全身各器官系統(tǒng)功能具有重要調(diào)節(jié)作用，特別是參與調(diào)節(jié)與肥胖相關(guān)的胰島素抵抗和葡萄糖代謝紊亂。
　　

2、 成肌作用是一個(gè)復(fù)雜并受到高度調(diào)控的過程，包括細(xì)胞周期阻滯和肌肉特異性轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)。骨骼肌已經(jīng)被確定作為一個(gè)主要的糖代謝組織。肌細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)，作為一種重要的能量來源，在運(yùn)動(dòng)中提供線粒體氧化所需要的能量。越來越多的研究證明，肌細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過度積累與胰島素抵抗明顯呈正相關(guān)。研究脂肪-骨骼肌之間的對(duì)話（crosstalk）對(duì)闡明骨骼肌胰島素抵抗的發(fā)生的機(jī)理有重要的意義。
　　 脂聯(lián)素是近年來新發(fā)現(xiàn)的一個(gè)脂肪細(xì)胞因子，脂聯(lián)素由脂肪細(xì)胞分

3、泌后進(jìn)入血液，以多種形式在血液中循環(huán)。脂聯(lián)素球狀區(qū)在體內(nèi)獨(dú)立存在，與完整的脂聯(lián)素功能相似。脂聯(lián)素能夠促進(jìn)肌肉脂肪酸氧化、降低血漿甘油三酯、通過增強(qiáng)胰島素的敏感性而促進(jìn)葡萄糖代謝。
　　 本研究采用Real-Time PCR和細(xì)胞轉(zhuǎn)染等技術(shù)，研究了肌細(xì)胞成肌過程中細(xì)胞脂肪含量情況，脂聯(lián)素對(duì)該過程的影響，促卵泡生成素對(duì)AdipoR1的表達(dá)調(diào)控，豬APPL1和APPL2基因的克隆和生物學(xué)特性等進(jìn)行了研究，結(jié)果如下：
　　 1．

4、以C2C12成肌細(xì)胞為研究模型，添加2％馬血清作為誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基，用油紅O染色的方法對(duì)C2C12在成肌過程細(xì)胞內(nèi)脂肪含量進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)在這個(gè)過程中，細(xì)胞內(nèi)脂肪含量急劇減少
　　 2．用Real-Time PCR的方法，研究了在C2C12成肌過程中，糖脂代謝相關(guān)基因以及脂聯(lián)素受體相關(guān)基因的mRNA表達(dá)模式，證明了C2C12成肌過程中，肌細(xì)胞脂肪含量的減少是由于脂肪酸氧化增加，合成減少導(dǎo)致；并發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素受體的表達(dá)模式與成肌過程有相關(guān)

5、性。
　　 3．用基因轉(zhuǎn)染的方法，證實(shí)脂聯(lián)素參與了成肌過程脂肪含量減少的過程，并證明了脂聯(lián)素通過增加脂肪酸氧化途徑，而不是水解和合成途徑參與上述過程。
　　 4．通過同源分析比較，以人的APPL1和APPL2基因序列為參照，運(yùn)用RT-PCR的方法，獲得了豬APPL1和APPL2基因；以豬的心、肝、脾和肺等10個(gè)組織樣品作為研究材料，通過定量PCR分析獲得了豬APPL1和APPL2的組織表達(dá)譜；通過電子定位的方法進(jìn)行APP