版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:通過觀察放射性肝損傷(RILD)大鼠模型中的相關(guān)細胞因子的表達水平變化,找到減少放射性肝損傷作用和早期診斷損傷發(fā)生的生物標記分子以及引起相關(guān)信號通路改變的關(guān)鍵靶點;分析并引發(fā)RILD的潛在機制和治療 RILD的潛在靶點。
方法:利用單次照射總劑量20Gy建立SD大鼠放射性損傷模型。完成放療后,觀察大鼠存活情況和精神、活動、皮毛,體重以及飲食等狀態(tài),在各時間點處死大鼠前檢測大鼠體重變化。在放療完成后3d,1,2,4,8,1
2、2周后分別取肝組織和血液樣本。分析大鼠血清中透明質(zhì)酸(Hyaluronic acid,HA)、層粘連蛋白(Laminin,LN)、Ⅲ型前膠原(Procollagen-Ⅲ,PC-Ⅲ),以及IV型膠原(IV-C)的改變,用于分析放射性肝損傷后,肝纖維化的改變。HE染色和Masson染色法進行大鼠放射性肝損傷組織學(xué)分析,TUNEL試劑盒分析放射性肝損傷凋亡情況。免疫組化分析放射性肝損傷細胞因子和生長因子表達情況。Real-time PCR檢測
3、大鼠放射性肝損傷細胞因子變化。Western blot檢測大鼠放射性肝損傷細胞因子蛋白變化。分離,純化并培養(yǎng)原代大鼠 Kupffer細胞;免疫組化法鑒定 Kupffer細胞表面標記F4/80表達。隨機分為對照組,放射組和氯化釓組。MTT法分別檢測各組細胞增殖情況。Caspase3凋亡試劑盒檢測各組細胞凋亡情況。ELISA法和Real-timePCR檢測各組細胞因子和生長因子的分泌變化。
結(jié)果:⑴接受照射總劑量20Gy的照射后,
4、放射性肝損傷實驗組大鼠的體重降低,與對照組比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與對照組比較,放射性肝損傷實驗組大鼠體重從放射結(jié)束后第2周就逐漸降低,一直持續(xù)至第12周研究結(jié)束,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);⑵放射性肝損傷組大鼠血清AST、ALT、ALP酶活性在受照射后第2周開始升高,照射后直至研究結(jié)束的第12周達到高峰(P<0.05)??偰懠t素和直接膽紅素水平無統(tǒng)計學(xué)意義;⑶透明質(zhì)酸(HA)、層粘連蛋白(LN)、Ⅲ型前膠原(
5、PC-Ⅲ),以及IV型膠原(IV-C)在照射后,變化不顯著;⑷HE染色和 Masson染色可見放射性肝損傷病理改變隨放射后時間增加而明顯;⑸放射肝損傷后大鼠肝細胞凋亡增加;⑹免疫組化顯示TGF-β1,NF-κBp65,Smad4,Smad3,Smad7,TNF-α,CTGF在放射性肝損傷后都呈陽性表達,且隨著放射完成時間的延長,而表達增加更加明顯;⑺Realtime PCR和 Western blot結(jié)果顯示 TGF-β1,NF-κBp
6、65,Smad4,Smad3,Smad7,TNF-α,CTGF在放射性肝損傷后在不同時間點表達增加,且增加程度各異差異,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);⑻原代培養(yǎng)的Kupffer細胞具有典型的巨噬細胞特征,純度高,經(jīng)鑒定F4/80表達陽性;⑼接受放射后可促進Kupffer細胞的增殖(P<0.05);而應(yīng)用Kupffer細胞抑制劑氯化釓作用后,Kupffer細胞增殖被抑制(P<0.05)。接受照射可抑制Kupffer細胞Capase3的活
7、性加(P<0.05);而應(yīng)用Kupffer細胞抑制劑氯化釓作用后,Kupffer細胞Capase3的活性增加,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);⑽在放射活化的Kupffer細胞中 TGF-β1,NF-κBp65,Smad4,Smad3,Smad7, TNF-α,CTGF表達明顯增加,與對照組比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。加入氯化釓作用后,可抑制細胞因子和生長因子的表達,與照射組比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 放射性肝損傷的發(fā)病機制及防治策略研究.pdf
- 氫生理鹽水對大鼠放射性肝損傷的保護作用及機制研究.pdf
- 大鼠低劑量放射性心臟損傷及其機制研究.pdf
- 放射性心臟損傷的分子影像學(xué)監(jiān)測及機制研究.pdf
- EGCG對大鼠放射性肺損傷的保護作用及機制研究.pdf
- 射波刀照射家兔致急性放射性肝損傷相關(guān)分子機制的初步研究.pdf
- 大鼠放射性腦損傷模型早期分子靶向示蹤研究.pdf
- 放射性損傷的分子基礎(chǔ)及治療策略.pdf
- 咖啡酸苯乙酯抗大鼠急性放射性肝損傷的實驗研究.pdf
- PDTC阻斷炎癥通路減輕大鼠放射性心臟損傷的機制研究.pdf
- 早期放射性中耳炎損傷機制研究.pdf
- 放射性肝損傷3.0t磁共振實驗研究
- 早期放射性肝損傷的電阻抗頻譜特性研究.pdf
- 大鼠急性放射性胃損傷及其保護的研究.pdf
- 大鼠放射性腎損傷模型制作及影像學(xué)評價.pdf
- 慢性間歇性低壓低氧減輕大鼠放射性心臟損傷的機制研究.pdf
- 丹參酮對大鼠放射性肝損傷的治療保護作用的試驗研究.pdf
- 扶正活血清熱方治療大鼠放射性直腸損傷的作用機制研究.pdf
- 扶正活血清熱方治療大鼠放射性直腸損傷的作用機制研究
- 肝癌立體定向放射治療后放射性肝損傷MRI表現(xiàn)的實驗及臨床研究.pdf
評論
0/150
提交評論