MMP-7及MMP-19在膽道閉鎖幼鼠動(dòng)物模型肝臟組織中的表達(dá).pdf

1、目的:膽道閉鎖于亞洲地區(qū)發(fā)病率高，目前國(guó)內(nèi)采用Kasai手術(shù)緩解膽汁淤積。雖然外科干預(yù)可以有效緩解患兒膽汁排出不暢，但并不能阻止BA患兒進(jìn)行性肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展。膽道閉鎖患兒自體肝的20年生存率為21％-44％，而且多數(shù)長(zhǎng)期生存的患兒均有不同程度相關(guān)并發(fā)癥的發(fā)生。最終，膽道閉鎖Kasai手術(shù)后患兒均需通過肝移植獲得長(zhǎng)期存活，但生存質(zhì)量令人堪憂，給社會(huì)和家庭都帶來巨大打擊。肝纖維化是多種病因所致肝內(nèi)結(jié)締組織異常增生，肝內(nèi)彌漫性細(xì)胞外基質(zhì)

2、過度沉淀的病理過程。目前認(rèn)為，肝纖維化是可以逆轉(zhuǎn)的，而肝硬化則是難以逆轉(zhuǎn)。如果可以阻斷、減緩乃至逆轉(zhuǎn)肝纖維化，就能很大程度地改善肝病的預(yù)后及預(yù)防肝硬化的發(fā)生。
　　本研究以膽道閉鎖幼鼠模型為研究對(duì)象，利用免疫組織化學(xué)染色方法、蛋白質(zhì)印記法等研究MMP-7和MMP-19在不同纖維化程度肝臟組織中表達(dá)和分布情況。探討二者在膽道閉鎖肝纖維化中的作用機(jī)制。
　　研究方法:
　　一、標(biāo)本制備及分組: WISTAR出生3天小鼠，隨

3、機(jī)分組為實(shí)驗(yàn)組，對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組于全麻下行膽總管結(jié)扎術(shù)，對(duì)照組于全麻下行開腹及關(guān)腹
　　二、實(shí)驗(yàn)技術(shù)
　　應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法、蛋白印記法及RT-PCR分別檢測(cè)MMP-7及MMP-19在對(duì)照組和病例組肝臟組織標(biāo)本中的分布和表達(dá)情況。
　　三、數(shù)據(jù)分析
　　采用SPSS20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量數(shù)據(jù)以(x)±s表示，數(shù)值比較采用t檢驗(yàn)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1.MMP-

4、7
　　免疫組化:3d、7d、14d、21d、28d中MMP-7實(shí)驗(yàn)組表達(dá)高于對(duì)照組。WB:3d、7d、21d、28d中MMP-7在實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)均高于對(duì)照組。14d組中MMP-7無明顯差異。RT-PCR: MMP-7在3d、7d、21d、28d幼鼠肝臟組織中實(shí)驗(yàn)組表達(dá)均高于對(duì)照組，且P值＜0.05，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;MMP-7在14d組中實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組P=0.05，結(jié)果不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.MMP-19
　　免疫

5、組化:3d、7d、14d、21d、28d中MMP-19實(shí)驗(yàn)組表達(dá)低于對(duì)照組。WB:3d、7d、14d、21d、28d中MMP-19實(shí)驗(yàn)組表達(dá)低于對(duì)照組，且以14d表達(dá)為最明顯。RT-PCR:MMP-19在3d、7d、14d、21d、28d幼鼠肝臟組織中實(shí)驗(yàn)組表達(dá)均低于對(duì)照組，且P值均P＜0.05，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
　　結(jié)論:
　　1.MMP-7及MMP-19在膽道閉鎖肝纖維化模型中表達(dá)差異明顯。
　　2.MMPs參與