兩種兩色金雞菊活性成分對(duì)胰島細(xì)胞保護(hù)作用及小分子敲除初步探索.pdf

1、目的：⑴探討兩色金雞菊黃酮成分馬里苷對(duì)胰島β細(xì)胞的保護(hù)作用及可能機(jī)制；⑵探討雪菊多糖對(duì)胰島β細(xì)胞的增殖活性和胰島素分泌情況的影響；⑶合成并鑒定馬里苷結(jié)構(gòu)類似物柚皮苷的人工完全抗原，為制備柚皮苷的單克隆抗體及建立相應(yīng)的免疫學(xué)分析方法敲除小分子柚皮苷奠定基礎(chǔ)。
　　方法：①運(yùn)用四甲基偶氮唑鹽比色法（MTT）檢測(cè)馬里苷對(duì)MIN6細(xì)胞增殖的影響；酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)胰島素分泌量；Western Blot方法檢測(cè)細(xì)胞中BAX，Bcl

2、-2蛋白表達(dá)水平；②運(yùn)用四甲基偶氮唑鹽比色法（MTT）檢測(cè)雪菊多糖對(duì)MIN6細(xì)胞增殖的影響；酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)胰島素分泌量；③采用過(guò)碘酸鹽氧化法合成柚皮苷人工抗原；紫外光譜和薄層色譜法鑒定人工抗原偶聯(lián)是否成功。
　　結(jié)果：⑴與正常對(duì)照組比較，高糖高脂模型組MIN6細(xì)胞存活率明顯降低（P<0.05），不同濃度馬里苷干預(yù)組MIN6細(xì)胞增殖均顯著增加(P<0．05)。與正常對(duì)照組比較，高糖高脂模型組MIN6細(xì)胞胰島素分泌量明顯

3、降低（P<0.05）；與高糖高脂模型組比較，馬里苷給藥組MIN6細(xì)胞胰島素分泌量明顯升高（P<0.05）。Western印跡顯示，與正常對(duì)照組比較，BAX蛋白表達(dá)量模型組增多，給藥組隨濃度遞增依次減少；Bcl-2蛋白相對(duì)模型組減少，給藥組隨濃度增加依次增多（P<0.05）；⑵與正常對(duì)照組比較，高糖高脂模型組細(xì)胞存活率明顯降低（P<0.05），不同濃度雪菊多糖干預(yù)組MIN6細(xì)胞增殖均顯著增加(P<0．05)。與正常對(duì)照組比較，高糖高脂模型