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文檔簡介
1、蟲草是一類具有很高藥用價值、應(yīng)用前景廣泛的真菌。本研究對粉被蟲草分離菌株RCEF4585、雙梭孢蟲草分離菌株RCEF4337及珊瑚蟲草分離菌株RCEF4022菌絲體中的天然色素進行了系統(tǒng)性研究,具體內(nèi)容主要包括:菌絲色素粗提取HPLC-MS分析;色素組分分離純化;色素組分的鑒定;色素組分穩(wěn)定性研究。
通過HPLC-ESI-MS分析發(fā)現(xiàn),菌株RCEF4585菌絲體甲醇粗提物中的天然色素物質(zhì)并非單一的化合物,而是多種黃色色素的
2、混合物,主要色素化合物的分子式為C26H32O9,其紫外特征吸收峰分別為228nm、260nm、413nm、434nm。根據(jù)化合物的分子式和特征吸收波長,查詢Chapman&Hall天然數(shù)據(jù)化合物,未發(fā)現(xiàn)相匹配的已知化合物,初步判斷該化合物是一新化合物。
菌株RCEF4022甲醇粗提物經(jīng)HPLC-MS分析發(fā)現(xiàn),提取物中只含有一種色素物質(zhì),質(zhì)譜分析得出其分子式為C30H18O12,對應(yīng)紫外特征吸收峰225nm、266nm、2
3、97nm、467nm。根據(jù)該化合物的分子式和特征吸收波長查詢,發(fā)現(xiàn)該化合物與Dicatenarin 衍生物2,2',4,4',5,5'-Hexahydroxy-7,7'-dimethoxy-1,1'-bianthraquinone一致,為羥基蒽醌類色素。該化合物從蟲生真菌中分離得到尚屬首次。
HPLC-ESI-MS分析結(jié)果表明RCEF4337甲醇粗提物中的主要天然色素物質(zhì)和RCEF4585菌絲甲醇提取物中色素物質(zhì)一致。該菌
4、菌絲乙酸乙酯粗提物中的主要色素化合物為C30H18O13,其對應(yīng)的特征吸收峰為225nm、266nm、297nm、503nm。根據(jù)該化合物的分子式和紫外特征吸收波長,查詢Chapman&Hall天然數(shù)據(jù)庫,未發(fā)現(xiàn)相匹配的已知化合物,初步判斷該化合物是一新化合物。
采用HSCCC對菌株RCEF4585菌絲中的目標(biāo)色素物質(zhì)P-1 進行了分離,溶劑體系為V(乙酸乙酯):V(正丁醇):V(甲醇):V(水)=10:3:3:10,以其
5、下相為流動相,上相為固定相,轉(zhuǎn)速850r/min,流速為2mL/min,紫外檢測波長340nm。利用Semi-Preparation HPLC 方法對菌株RCEF4022和菌株RCEF4337菌絲提取物中色素物質(zhì)進行純化分離,共分離得到兩個化合物P-2及P-4。經(jīng)HPLC峰面積歸一化法計算出三個化合物的純度都達到95%以上,高分辨HPLC-MS分析結(jié)果表明所得到的三個色素化合物分子式分別為C26H32O9、C30H18O12以及C30H
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