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文檔簡介
1、背景:人組織因子途徑抑制物2(TFPI2)是一種含有庫尼樣結構域的絲氨酸蛋白酶抑制劑,它可以影響許多腫瘤細胞的侵襲和遷移。最近的研究表明TFPI2不僅可以影響細胞外基質(ECM)的完整性,還可以影響許多癌基因的表達,但TFPI2調節(jié)基因表達的分子機制還不是很明確。
目的:探討在乳腺癌MDA-MB-231細胞中TFPI2對基質金屬蛋白酶2(MMP2)mRNA表達的影響及其分子機制。
方法:
(1)通過West
2、ern blot檢測MDA-MB-231細胞內TFPI2的表達情況。
?。?)細胞增殖(MTT)和細胞侵襲(Transwell)實驗用來檢測TFPI2對MDA-MB-231細胞功能的影響。
(3)Real time PCR分析MDA-MB-231細胞內基質金屬蛋白酶(MMPs)的表達情況。
?。?)免疫熒光檢測TFPI2在MDA-MB-231細胞內的分布。
(5)熒光素酶報告基因和染色質共沉淀實驗檢測
3、TFPI2如何調控活化蛋白-2(AP-2α)影響MMP2 mRNA的表達。
?。?)免疫共沉淀實驗檢測TFPI2與AP-2α之間是否存在相互作用。
結果:
(1)TFPI2的表達抑制MDA-MB-231細胞的增殖和侵襲。
(2)在MDA-MB-231細胞中,TFPI2的表達抑制MMP-2 mRNA的表達。
(3)TFPI-2分布在MDA-MB-231細胞漿及細胞核中。
(4)TF
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