民族藥槐枝抗心肌缺血缺氧藥效物質基礎研究.pdf

1、槐枝為貴州省民族藥之一，是豆科植物槐Sophora japonicaL.的新鮮或干燥嫩枝，具有散瘀止血，清熱燥濕，祛風殺蟲等功效，用于治療崩漏，赤白帶下，痔瘡，陰囊濕癢，心痛，目赤，疥癬等癥。藥用歷史悠久，最早收載于《名醫(yī)別錄》。歷代醫(yī)書記載其用于治療心痛，槐枝治療的“心腹痛”“卒心痛”等與現(xiàn)代醫(yī)學的心肌缺血缺氧以及心肌梗死具有一定的相似性。但目前缺乏槐枝的化學活性物質及相關藥理作用的研究，特別是有關槐枝抗心肌缺血缺氧的相關研究報道，成

2、為阻礙槐枝藥材治療心痛藥物開發(fā)和應用的重要因素。為了更好的的開發(fā)、利用民族藥材槐枝，本文主要做了以下方面的研究:
　　采用氣相色譜-質譜聯(lián)用法分離鑒定槐枝鮮品和干品揮發(fā)性成分，從新鮮槐枝揮發(fā)油中分離出60種成分，鑒定出58種化學成分，占揮發(fā)油總量的97.73％;從干燥槐枝揮發(fā)油中分離出56種成分，其中鑒定出46種化學成分，占揮發(fā)油總量的92.86％。新鮮和干燥槐枝主要成分為烷、烯、醇、酸、酯等，其中棕櫚酸、亞油酸、油酸等含量相對較

3、高，而干燥槐枝還含有與其抗心痛相關的活性成分角鯊烯，且含量較高。從揮發(fā)油化學組成和藥材存儲等角度，建議槐枝在治療心痛時應以干燥品為主。
　　采用腹腔注射鹽酸異丙腎上腺素(ISO)建立小鼠心肌缺血缺氧模型，觀察槐枝各萃取部位對小鼠心電圖S-T段的影響，槐枝正丁醇及乙酸乙酯萃取部位高、低劑量（高劑量相當于原藥材8g/kg、低劑量相當于原藥材4g/kg，下同）均能極顯著的抑制小鼠心電圖S-T段抬高;并采用常壓耐缺氧模型，觀察槐枝各萃取部

4、位對小鼠存活時間的影響，槐枝乙酸乙酯萃取部位高低劑量能極顯著的延長小鼠存活時間，槐枝乙酸乙酯萃取部位高劑量能顯著的延長小鼠存活時間。說明槐枝乙酸乙酯及正丁醇萃取部位具有明顯的抗心肌缺血缺氧作用，且槐枝乙酸乙酯萃取部位抗心肌缺血缺氧作用強于槐枝正丁醇萃取部位。
　　利用大孔樹脂AB-8對具有抗心肌缺血缺氧作用的槐枝乙酸乙酯及正丁醇萃取部位依次用水、50％乙醇及95％乙醇進行梯度洗脫，以15min內小鼠Ⅱ導聯(lián)心電圖S-T段（J點）變化

5、的幅度，血清及心肌組織生化指標，小鼠心肌組織顯微結構變化，小鼠常壓耐缺氧存活時間為指標對槐枝各洗脫物進行抗心肌缺血缺氧活性篩選。研究結果顯示槐枝正丁醇萃取部位50％乙醇洗脫物及槐枝乙酸乙酯萃取部位95％乙醇洗脫物可顯著減少小鼠心電圖ST段的偏移量，可顯著降低小鼠血清中的CK活性及CK-MB、cTn-Ⅰ的含量，可顯著提高心肌組織SOD活性、降低MDA含量，可顯著延長小鼠常壓耐缺氧時間，保護心肌組織損傷。提示槐枝正丁醇萃取部位50％乙醇洗脫

6、物和槐枝乙酸乙酯萃取部位95％乙醇洗脫物為槐枝抗心肌缺血缺氧活性部位。采用理化鑒別的方法對活性洗脫物進行化學成分定性研究，發(fā)現(xiàn)其主要為黃酮類成分，提示槐枝抗心肌缺血缺氧活性部位可能為黃酮類成分。
　　采用現(xiàn)代的分離方法對具有抗心肌缺血缺氧活性的槐枝乙酸乙酯萃取部位95％乙醇洗脫物的化學成分進行分離，得到一個無色簇狀針晶化合物，通過物理性質及波譜數據鑒定為高麗槐素。通過建立鈣離子拮抗模型對其進行初步藥效研究，發(fā)現(xiàn)其具有一定的鈣離子拮