基于納米膠束的腫瘤診斷與治療的初步研究.pdf

1、阿霉素（Doxorubicin，Dox）是一種廣譜抗腫瘤藥物，可抑制RNA和DNA的合成，屬于周期非特性藥物，對(duì)于各種生長(zhǎng)周期的腫瘤細(xì)胞都具有殺滅作用。1,2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)2000]（DSPE-PEG2000）是一種FDA批準(zhǔn)的雙親性表面活性劑，可用于修飾疏水性藥物，并增加藥物在血液中的長(zhǎng)循環(huán)。雙(4-(N-(2-萘基)苯胺基)苯基)-反丁烯二腈（NPAPF）是一種不溶于水的長(zhǎng)波長(zhǎng)的基

2、于聚集誘導(dǎo)發(fā)光（Aggregation-induced emission，AIE）的熒光染料分子。本課題的設(shè)計(jì)思路，用同一種有機(jī)溶劑分別將Dox，NPAPF和DPEG-PEG2000混合后，用物理方法除去有機(jī)溶劑，水化使其自組裝成納米粒子，制成診療一體化納米膠束（M-Dox/NPAPF）。
　　首先用4-溴苯乙腈、碘和甲氧基鈉合成雙(4-溴苯基)反丁烯二腈，再用Pd/P(t-Bu)3催化劑催化雙(4-溴苯基)反丁烯二腈、N-苯基取

3、代基胺和甲苯反應(yīng)合成NPAPF分子，最后用1:1的石油醚/二氯甲烷進(jìn)行分離純化。得到的產(chǎn)品經(jīng)核磁共振波譜分析與文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)一致。從紫外和熒光光譜上看，DSPE-PEG2000包封Dox后，未使其改性；M-NPAPF也具有AIE性質(zhì)；M-Dox/NPAPF的光穩(wěn)定性良好。TEM和激光納米粒度儀的分析結(jié)果顯示，M-Dox/NPAPF的形貌較好，粒度較為均勻，粒徑在20 nm左右。體外釋放實(shí)驗(yàn)顯示M-Dox/NPAPF在酸性條件下釋放更快，具有p

4、H依賴(lài)性。
　　以小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞（CT-26）為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，游離 Dox、M-Dox和M-Dox/NPAPF與細(xì)胞孵育24 h后的IC50分別是12.73±0.93（μg/mL）、10.68±0.85（μg/mL）、3.92±0.43（μg/mL），M-Dox/NPAPF的IC50最低；以激光共聚焦實(shí)驗(yàn)來(lái)評(píng)價(jià) M-Dox/NPAPF在細(xì)胞層面的成像效果，并觀察到 Dox和NPAPF均分布在細(xì)胞質(zhì)中。
　　以

5、荷CT-26瘤的BALB/c小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，以小動(dòng)物活體熒光成像實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)了M-Dox/NPAPF的成像效果和生物分布，觀察到納米膠束在腫瘤部位發(fā)出很強(qiáng)的熒光并且大量富集在肝和腫瘤部位；以實(shí)體瘤的生長(zhǎng)曲線，體積，質(zhì)量以及荷CT-26瘤小鼠的體征為參數(shù)考察了游離Dox、M-Dox和M-Dox/NPAPF的治療效果，它們的抑瘤率分別為68.54％、69.55%、59.18%，且它們之間無(wú)明顯差異。從HE染色切片的結(jié)果看，M-Dox/NPAPF