PPAR-γ、MMP-9在急性冠脈綜合征合并糖尿病患者外周血中的變化及相關(guān)性研究.pdf

1、目的:
　　本文旨在通過收集臨床病例，分析觀察急性冠脈綜合征（ACS）合并2型糖尿?。═2DM）患者與單純急性冠脈綜合征患者外周血核轉(zhuǎn)錄因子過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPAR-γ）、基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）、內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）、蛋白質(zhì)和mRNA的變化，進一步探討PPAR-γ對ACS合并2型糖尿病患者內(nèi)皮保護、斑塊穩(wěn)定等方面的影響，為ACS合并糖尿病患者新的藥物治療思路提供理論依據(jù)。
　　方法:
　

2、　選取診斷為ACS患者82例，其中合并T2DM的42例（ACSDM組），非糖尿病患者40例（ACS組）。均行冠狀動脈造影術(shù)，至少一支冠脈病變狹窄≥50％。30例無冠心病及糖尿病患者作為對照組。所有入選者在胸痛發(fā)作24小時內(nèi)抽取靜脈血，梯度分離法分離淋巴細胞，采用裂解液提取總蛋白，BCA試劑盒測定蛋白濃度，Western blot檢測淋巴細胞PPAR-γ、MMP-9、eNOS蛋白質(zhì)的表達，軟件分析測定蛋白條帶的灰度值，計算目的蛋白/β-a

3、ctin的比值；Trizol法提取淋巴細胞RNA，逆轉(zhuǎn)錄試劑盒逆轉(zhuǎn)錄DNA，RT-PCR測定淋巴細胞PPAR-γ、MMP-9、eNOS mRNA的表達，用Light Cycler自帶分析軟件進行數(shù)據(jù)處理，用2-ΔΔCt法分析數(shù)據(jù)。應(yīng)用SPSS19.0對各組數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。
　　結(jié)果:
　　1、各組基線資料比較：對照組、ACS組、ACSDM組患者在年齡、性別、體重指數(shù)、吸煙者比例、高血壓病史、他汀藥物使用史、甘油三酯（TG

4、）、高密度脂蛋白（HDL-CH）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-CH）、血肌酐（Cr）、血尿素氮（BUN）等方面的差別在統(tǒng)計學上無意義（P均＞0.05）。ACSDM組與ACS組在既往冠心病史、STEMI/NSTEMI病例數(shù)方面無統(tǒng)計學差異（P均＞0.05）?？崭寡牵‵PG）、糖化血紅蛋白（HbA1C）水平，ACSDM組顯著高于對照組和ACS組（P＜0.05），F(xiàn)PG、HbA1C水平在對照組、ACS組間無統(tǒng)計學差別（P均＞0.

5、05）。
　　2、外周血PPAR-γmRNA表達水平比較：ACS組、ACSDM組PPAR-γmRNA表達水平較對照組顯著減少（P均＜0.05），ACSDM組 PPAR-γmRNA表達水平低于ACS組（P＜0.05）。對照組PPAR-γmRNA表達相對值1.62±0.22，ACS組0.95±0.13， ACSDM組0.51±0.11。
　　3、外周血eNOSmRNA表達水平比較：ACS組eNOS mRNA表達水平低于對照組（P

6、＜0.05），ACSDM組eNOS mRNA表達水平顯著低于對照組（P＜0.05），ACSDM組eNOSmRNA表達水平低于ACS組（P＜0.05）。對照組外周血淋巴細胞eNOSmRNA表達相對值1.32±0.13，ACS組0.66±0.11，ACSDM組0.39±0.08。
　　4、外周血MMP-9mRNA表達水平比較：ACS組、ACSDM組MMP-9mRNA表達水平較對照組顯著升高（P均＜0.05），ACSDM組 MMP-9m

7、RNA表達水平高于ACS組（P＜0.05）。對照組MMP-9mRNA表達相對值0.33±0.12，ACS組1.54±0.12，ACSDM組2.10±0.20。
　　5、外周血PPAR-γ蛋白表達水平比較：ACS組、ACSDM組PPAR-γ蛋白質(zhì)表達水平較對照組明顯下降（P均＜0.05），ACSDM組PPAR-γ蛋白質(zhì)表達水平較ACS組降低更顯著（P＜0.05）。對照組外周血PPAR-γ灰度值1.45±0.19，ACS組0.82±0

8、.09，ACSDM組0.56±0.08。
　　6、外周血eNOS蛋白表達水平比較：ACS組、ACSDM組eNOS蛋白質(zhì)表達水平較對照組明顯下降（P均＜0.05），ACSDM組eNOS蛋白質(zhì)表達水平較ACS組降低更顯著（P＜0.05）。對照組外周血eNOS灰度值0.70±0.13，ACS組0.33±0.06，ACSDM組0.08±0.04。
　　7、外周血MMP-9蛋白表達水平比較：ACS組、ACSDM組MMP-9蛋白質(zhì)表達水

9、平較對照組明顯升高（P均＜0.05），ACSDM組MMP-9蛋白質(zhì)表達水平較ACS組升高更顯著（P＜0.05）。對照組外周血MMP-9灰度值0.18±0.06，ACS組0.38±0.09，ACSDM組0.97±0.15。
　　8、ACSDM組Gensini積分顯著高于ACS組（42.49±5.02 VS 27.93±7.11，P＜0.01）。
　　9、相關(guān)性分析：Gensini積分與外周血PPAR-γ（r=-0.803，P＜

10、0.01）、外周血eNOS水平（r=-0.873，P＜0.01）均呈負相關(guān)趨勢，Gensini積分與外周血MMP-9（r=0.965，P＜0.01）呈正相關(guān)趨勢。外周血PPAR-γ表達水平與eNOS表達水平呈正相關(guān)趨勢（r=0.95，P＜0.01），與MMP-9表達水平呈負相關(guān)趨勢（r=-0.816，P＜0.01），eNOS表達水平與MMP-9表達水平呈負相關(guān)趨勢（r=-0.865，P＜0.01）。
　　結(jié)論:
　　1、AC

11、S患者外周血PPAR-γ、eNOS蛋白質(zhì)和mRNA表達水平明顯降低，ACS合并糖尿病患者二者下降水平更顯著。提示PPAR-γ的內(nèi)皮保護作用可能與eNOS有關(guān)。
　　2、ACS患者外周血MMP-9蛋白質(zhì)和mRNA表達水平明顯升高，ACS合并糖尿病的患者二者升高水平更顯著。提示MMP-9可能參與了糖尿病患者 ACS的發(fā)生發(fā)展。
　　3、PPAR-γ與MMP-9之間呈負相關(guān)趨勢，PPAR-γ與eNOS之間呈正相關(guān)趨勢，PPAR-γ