沙利度胺治療GIVM的機(jī)制及療效和安全性研究.pdf

1、背景：
　　胃腸道血管畸形（GIVM）是引起不明原因消化道出血的主要原因，約占70%。到目前為止，GIVM的發(fā)病機(jī)制仍然是一個(gè)未解之謎。目前研究發(fā)現(xiàn)，低氧下表達(dá)增高的HIF1α和HIF2α與血管生成有關(guān)。然而，尚缺乏HIF1α和HIF2α在GIVM發(fā)病中作用機(jī)制的研究。研究證實(shí)沙利度胺治療GIVM具有良好的療效，其長(zhǎng)期臨床療效及安全性尚需大樣本長(zhǎng)期隨訪研究證實(shí)。
　　第一部分 HIF1α和HIF2α在GIVM發(fā)病中的作用及沙

2、利度胺對(duì)其表達(dá)的影響
　　目的：探討HIF1α和HIF2α在胃腸道血管畸形發(fā)病中的作用及沙利度胺對(duì)其表達(dá)的影響。
　　方法：免疫組化染色研究 GIVM患者手術(shù)切除標(biāo)本及正常對(duì)照組織中HIF1α和HIF2α的表達(dá)情況。體外培養(yǎng)原代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC），Western blot方法檢測(cè)常氧及低氧培養(yǎng)條件下HUVEC中HIF1α和HIF2α的表達(dá)情況。小鼠胸主動(dòng)脈環(huán)血管形成實(shí)驗(yàn)了解常氧及低氧培養(yǎng)下主動(dòng)脈環(huán)血管形成情況。低

3、氧條件下培養(yǎng)HUVEC，同時(shí)予以200ug/ml沙利度胺刺激HUVEC不同時(shí)間；或予以不同濃度沙利度胺刺激HUVEC48小時(shí)，免疫熒光、Western blot方法檢測(cè)沙利度胺干預(yù)后HUVEC中HIF1α和HIF2α蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.免疫組化染色顯示GIVM手術(shù)標(biāo)本中HIF1α和HIF2α表達(dá)明顯高于正常腸黏膜組織。
　　2.低氧培養(yǎng)下，HUVEC HIF1α和HIF2α蛋白表達(dá)明顯高于常氧培養(yǎng)。

4、>　　3.低氧培養(yǎng)下，小鼠胸主動(dòng)脈環(huán)血管形成明顯增多。4沙利度胺可以在體外抑制低氧培養(yǎng)下HUVEC HIF1α和HIF2α蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)論：HIF1α和HIF2α可能與GIVM發(fā)病機(jī)制有關(guān)，沙利度胺可以抑制低氧情況下HUVEC HIF1α和HIF2α蛋白的表達(dá)。
　　第二部分 HIF1α和HIF2α對(duì)血管生成通路的影響
　　目的：探討HIF1α和HIF2α對(duì)血管生成通路的影響。
　　方法：過表達(dá)HUVEC

5、HIF1α和HIF2α基因后，實(shí)時(shí)定量PCR法和Western blot方法測(cè)定其HIF1α、HIF2α、VEGF、Notch1、Dll4及Ang2 mRNA和蛋白表達(dá)水平，雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)了解HIF1α和HIF2α對(duì)VEGF基因啟動(dòng)子區(qū)域活性的影響。Matrigel膠小管形成實(shí)驗(yàn)了解HIF1α和HIF2α對(duì)HUVEC血管形成能力的影響。
　　結(jié)果：過表達(dá)HUVEC的HIF1α和HIF2α水平后，VEGF基因啟動(dòng)子區(qū)域活性明

6、顯增強(qiáng)，VEGF、Notch1、 Dll4和Ang2的mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯升高，血管生成明顯增加。
　　結(jié)論：過表達(dá)HIF1α和HIF2α可促進(jìn)VEGF、Notch1、Dll4和Ang2 mRNA和蛋白的表達(dá)，促進(jìn)血管形成。
　　第三部分沙利度胺治療GIVM所致難治性消化道出血的長(zhǎng)期療效及安全性
　　目的：研究沙利度胺治療GIVM所致難治性消化道出血的長(zhǎng)期療效及安全性。
　　方法：前瞻性地收集GIVM出血患

7、者80例，所有入組患者予以沙利度胺口服治療，并隨訪至少1年以上。主要療效指標(biāo)指沙利度胺治療的總體有效率。次要療效指標(biāo)指完全止血率，并評(píng)價(jià)患者治療前后年均輸血量、年均出血次數(shù)、血紅蛋白水平和年均住院次數(shù)的變化。評(píng)價(jià)GIVM患者口服沙利度胺后不良反應(yīng)發(fā)生率。
　　結(jié)果：
　　1.完整隨訪期內(nèi)，沙利度胺治療GIVM所致難治性消化道出血的總體有效率為79.49%。
　　2.服用沙利度胺后，完全止血率為38.46%。GIVM出血