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文檔簡(jiǎn)介
1、目前,腦血管病仍是危害人類(lèi)健康的三大致死性疾病之一[1],隨著全球老齡化的到來(lái),預(yù)計(jì)未來(lái)20年內(nèi)腦梗死的發(fā)病率還會(huì)繼續(xù)上升[2]。其高發(fā)病率、高致殘率、高死亡率和高復(fù)發(fā)率、逐漸年輕化的特點(diǎn),已經(jīng)造成了嚴(yán)重的社會(huì)和家庭負(fù)擔(dān)。因此,研究如何治療腦卒中仍是國(guó)內(nèi)外學(xué)者、科學(xué)家的重要任務(wù)。循證醫(yī)學(xué)證明,重組組織型纖溶酶(r-tPA)是臨床上治療腦梗死的唯一有效藥物,但是由于受到溶栓時(shí)間窗短暫及溶栓治療后的出血轉(zhuǎn)化的限制,僅有3%-8.5%的腦卒中
2、患者能夠獲益。如何對(duì)時(shí)間窗外急性腦梗死患者在西醫(yī)西藥治療的基礎(chǔ)上給予更加有效的治療,是擺在我們面前的難題,祖國(guó)醫(yī)學(xué)中醫(yī)藥治療為我們帶來(lái)了廣闊的前景。中藥是含有多種成份的復(fù)合體,經(jīng)過(guò)多種藥物的合理配伍,恰好具備了這種多機(jī)制、多靶點(diǎn)的治療優(yōu)勢(shì)。以往治療腦缺血的研究主要側(cè)重于神經(jīng)保護(hù)或血管保護(hù),作用單一,而缺血后各細(xì)胞能否存活或修復(fù)有賴(lài)于各種細(xì)胞間的相互作用及信號(hào)傳遞,結(jié)果收效甚微。因此,研究中藥復(fù)方康腦液能否通過(guò)對(duì)神經(jīng)、血管功能等多方面保護(hù)
3、,減輕腦缺血再灌注損傷,對(duì)指導(dǎo)臨床具有重大現(xiàn)實(shí)意義。腦缺血再灌注損傷機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜,腦缺血本身可刺激腦內(nèi)分泌多種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的,其中一些神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子[3-6]具有神經(jīng)、血管的雙重保護(hù)作用,如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(BDNF)。同時(shí),腦缺血誘導(dǎo)細(xì)胞炎性因子釋放及破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),導(dǎo)致血腦屏障的完整性破壞,引起腦水腫及出血性轉(zhuǎn)化,進(jìn)一步加重神經(jīng)功能缺失的臨床表現(xiàn)。其中基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloprote
4、inase,MMPs)參與炎癥損傷反應(yīng),并在維持血腦屏障的功能等方面起負(fù)面影響[7]。
本實(shí)驗(yàn)主要通過(guò)建立腦缺血再灌注損傷的大鼠動(dòng)物模型,觀察康腦液對(duì)腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)行為、梗死灶面積和組織病理形態(tài)改變的影響;觀察其對(duì)腦缺血再灌注大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascularendothelial growth factor,VECF)、腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(brain derivedneurotrophic factor,BDNF
5、)、基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinas-e-9,MMP-9)、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulatedkinase1 and2,ERK1/2)表達(dá)的影響,探討康腦液對(duì)腦缺血再灌注大鼠的腦保護(hù)機(jī)制。
將雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組(Normal,n=36),假手術(shù)組(Shamo-perated,n=36),腦缺血再灌注模型組(I/R,n=36),康腦液高、中、低劑
6、量組(KNYH,KNYM,KNYL;28.6,14.3,7.15 g·kg-1·d-1;n=36);采用改進(jìn)Longa等線(xiàn)栓法制備右側(cè)大腦中動(dòng)脈阻塞(middle cerebral arteryocclusion,MCAO)再灌注大鼠模型,于缺血2h后再灌注(分別于再灌注后6h,12h,24h,3d,7d后,處死大鼠)。采用longa評(píng)分法進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分;將組織進(jìn)行HE染色后,使用光學(xué)顯微鏡觀察腦組織病理改變;采用TTC染色法測(cè)定腦
7、梗死體積;免疫組織化學(xué)法、原位雜交法觀察大鼠腦內(nèi)腦組織VEGF、BDNF、MMP-9、ERK1/2的表達(dá)規(guī)律。
與正常組及假手術(shù)組大鼠相比較,模型組大鼠腦缺血再灌注損傷后可見(jiàn)明顯的神經(jīng)行為改變及功能缺損;病變局部可見(jiàn)明顯的梗死灶且面積較大;神經(jīng)元細(xì)胞腫脹明顯;腦組織中表達(dá)的VEGF、BDNF、MMP-9、ERK1/2數(shù)量明顯升高,差異具有顯著性(P<0.05或P<0.01)。與模型組比較,康腦液高、中劑量劑量組大鼠腦缺血再灌注
8、損傷后神經(jīng)系統(tǒng)功能缺損癥狀均得到不同程度的改善,腦梗死體積減小,神經(jīng)元腫脹及間質(zhì)水腫等病理學(xué)改變得到不同程度減輕,腦組織中VEGF、BDNF及ERK1/2的表達(dá)量升高,而MMP-9表達(dá)量降低,具有顯著性差異(P<0.05)。康腦液低劑量組與康腦液模型組比較無(wú)顯著差異(P>0.05)。
康腦液可促進(jìn)大鼠局灶性腦缺血后腦組織中VEGF、BDNF的表達(dá),激活ERK1/2信號(hào)通路,同時(shí)抑制腦內(nèi)MMP-9的表達(dá),縮小梗死面積,降低神經(jīng)行
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