跑步鍛煉對(duì)抑郁癥CUS模型大鼠白質(zhì)毛細(xì)血管作用的體視學(xué)研究.pdf

1、跑步鍛煉已經(jīng)被證明是一種改善抑郁癥狀的輔助治療手段。然而，鍛煉抗抑郁作用的機(jī)制尚不清楚。以往的研究顯示跑步鍛煉能夠誘導(dǎo)腦血管發(fā)生和增加大腦中毛細(xì)血管密度。同時(shí)，有研究顯示抑郁癥模型老鼠大腦中出現(xiàn)了白質(zhì)毛細(xì)血管的改變。那么跑步鍛煉對(duì)抑郁癥的治療作用是否是通過(guò)影響毛細(xì)血管？目前國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道。慢性不可預(yù)知性刺激模型（CUS）很好的模擬了人類(lèi)抑郁癥心境低落、快感缺乏等核心癥狀，是國(guó)內(nèi)外公認(rèn)的接近抑郁癥發(fā)病機(jī)制和臨床表現(xiàn)的模型。在給予5周造模

2、和4周跑步鍛煉后，我們運(yùn)用24小時(shí)糖水實(shí)驗(yàn)和礦場(chǎng)實(shí)驗(yàn)來(lái)比較模型組和對(duì)照組的行為學(xué)差異，并且運(yùn)用體視學(xué)方法結(jié)合免疫組織化學(xué)技術(shù)來(lái)準(zhǔn)確定量研究大鼠大腦白質(zhì)內(nèi)毛細(xì)血管相關(guān)變量的改變以及跑步鍛煉對(duì)上述變量的影響。本研究運(yùn)用的方法為后續(xù)運(yùn)用該模型研究其他干預(yù)因素對(duì)抑郁癥腦內(nèi)血管作用提供了可靠、有效的研究手段，同時(shí)本研究的結(jié)果為相關(guān)研究提供了重要參數(shù)，提示血管因素在抑郁癥發(fā)病和治療中的重要地位，為臨床抗抑郁藥物的開(kāi)發(fā)提供了新的研究方向。
　　

3、第一部分
　　1.材料與方法
　　1.1 清潔級(jí)雄性SD大鼠，體重180～220g，由重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。經(jīng)糖水消耗和礦場(chǎng)試驗(yàn)篩選后隨機(jī)分為模型組和空白對(duì)照組各10只。參照Willner等的建模方法并加以改進(jìn)，建立大鼠CUS抑郁模型。模型組給與5周的慢性不可預(yù)知性刺激，空白對(duì)照組不給與處理。每周末行糖水消耗實(shí)驗(yàn),以判斷大鼠抑郁狀態(tài),第五周末同時(shí)進(jìn)行礦場(chǎng)實(shí)驗(yàn).
　　1.2 行為學(xué)測(cè)試結(jié)束后,每組隨機(jī)選取5只大鼠

4、。每只大鼠隨機(jī)選取一側(cè)大腦半球作1mm連續(xù)切片，在解剖顯微鏡下放大10倍拍照。運(yùn)用卡瓦列里原理計(jì)算大腦白質(zhì)的體積。
　　1.3 在每只大鼠的連續(xù)腦片中隨機(jī)抽取5塊大腦白質(zhì)塊，制作成厚度為4μm的超薄切片，然后每張切片在體視學(xué)顯微鏡下隨機(jī)選取10-15個(gè)視野拍照。
　　1.4 空白對(duì)照組和模型組大鼠大腦白質(zhì)內(nèi)毛細(xì)血管長(zhǎng)度密度和總長(zhǎng)度、體積密度和總體積及表面積密度和總表面積均用體視學(xué)方法分別計(jì)算。
　　2.結(jié)果
　　

5、2.1 模型組24小時(shí)糖水消耗百分比和礦場(chǎng)試驗(yàn)總得分均較空白對(duì)照組顯著性下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　2.2 模型組的大腦白質(zhì)總體積較空白對(duì)照組有下降的趨勢(shì)，但是差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　2.3 模型組的大腦白質(zhì)毛細(xì)血管長(zhǎng)度密度和總長(zhǎng)度較空白對(duì)照組有顯著性減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　2.4 模型組的大腦白質(zhì)毛細(xì)血管體積密度和總體積較空白對(duì)照組有顯著性減少，差異具有統(tǒng)

6、計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　2.5 模型組的大腦白質(zhì)表面積密度和總表面積較空白對(duì)照組有下降的趨勢(shì)，但是差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　第二部分
　　1.材料與方法
　　1.1 清潔級(jí)雄性SD大鼠，體重180～220g，由重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。經(jīng)糖水消耗和礦場(chǎng)試驗(yàn)篩選后分為模型組30只和空白對(duì)照組10只。造模方法同前，造模成功后在模型組中隨機(jī)選取20只成模大鼠分為模型對(duì)照組10只和跑步組10只

7、。其中跑步組大鼠置于水平跑臺(tái)上進(jìn)行規(guī)律的跑步鍛煉，速度：20m/min，時(shí)間：20min/d，5d/week。第八周末分別做糖水消耗實(shí)驗(yàn)、礦場(chǎng)實(shí)驗(yàn)。
　　1.2 行為學(xué)實(shí)驗(yàn)完成后，每組隨機(jī)選取5只大鼠作體視學(xué)研究，具體方法同前。
　　2.結(jié)果
　　2.1 第四周模型組在糖水消耗試驗(yàn)中糖水偏好百分比明顯低于對(duì)照組（P<0.05）；在接受四周跑步鍛煉后，跑步組糖水偏好百分比較模型對(duì)照組顯著升高（P<0.05），與空白對(duì)照組

8、相比，無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
　　2.2 在第四周的礦場(chǎng)試驗(yàn)中，慢性不可預(yù)知性刺激導(dǎo)致模型組總評(píng)分顯著低于對(duì)照組(P<0.05)；在接受四周跑步鍛煉后，跑步組大鼠總評(píng)分有增加趨勢(shì)，但與模型對(duì)照組和空白對(duì)照組相比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　2.3 跑步組白質(zhì)體積與模型對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與空白對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　2.4 模型組白質(zhì)內(nèi)毛細(xì)血管長(zhǎng)度密度和

9、總長(zhǎng)度與跑步組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；跑步組的長(zhǎng)度密度與空白對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；跑步組的毛細(xì)血管長(zhǎng)度與空白對(duì)照組相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　2.5 模型組白質(zhì)內(nèi)毛細(xì)血管體積分?jǐn)?shù)與跑步組相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；模型組白質(zhì)內(nèi)毛細(xì)血管體積與跑步組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；跑步組的白質(zhì)內(nèi)毛細(xì)血管體積分?jǐn)?shù)和體積與空白對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0

10、.05)。
　　2.6 模型組白質(zhì)內(nèi)毛細(xì)血管表面積密度與跑步組相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；模型組白質(zhì)內(nèi)毛細(xì)血管表面積與跑步組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；跑步組白質(zhì)內(nèi)毛細(xì)血管表面積密度和表面積與空白對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　全文結(jié)論
　　1.本文證實(shí)了跑步鍛煉對(duì)抑郁癥具有治療作用。
　　2.本研究將免疫組化技術(shù)和體視學(xué)手段相結(jié)合，準(zhǔn)確定量研究了CUS模型大鼠大腦白質(zhì)內(nèi)毛