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1、安徽農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文乳酸菌素LactocinAH的分離純化及特性研究姓名:謝繼輝申請學位級別:碩士專業(yè):微生物學指導教師:張明20080601AbstractFoodsecurityhasbecomeanincreasingconcemwiththeimprovementoflivingstandardsandtheincreaseofhealthawarenessMostChemicalpreservativeshavecerta
2、inharmtohealthManyresearchershaveattentiontothebacteriocinforitsefficientandsecurityInordertomakeuseofbacteriocin,LactocinAHagainstseveralGram—postivebacteriaWasresearchedinthispaperTheLactococcuslactisX一3isolatedfrompic
3、klebyOxfordcupmethodandcrossinhibitiontestTheantimicrobialsubstanceproducedfromX一3couldbeprecipitatedbyNH2(S04)andacetone;itwassensitivetoproteases,andactivedoverawidepHrangeConsideringthefeaturescitedabove,theantimicrob
4、ialsubstancewascl瓠sifiedasabacterocinThebacterocinhasbeennamedLactocinAHLactocinAHWassequentiallypurifiedbyammoniumsulfateprecipitation,heattreatmentandSP—SepharoseFFcationexchangechromatographyThepurifiedbacterocinappea
5、redasasingleproteinbandonthegelofTricine—SDS—PAGEThemolecularweightofLactocinAHwasintherangeof65~95kDTheeffectofpHonLactocinAHWastestedbydeterminedtheactivityafteradjustingthebacterocinsamplesformpH20to120withsterile10MN
6、aOHor10MHCITheresultsindicatedthatLactocinAHWasstableatavarietyofpHvalue(4~8)TheheatstabilityofLactocinAHWastestedbydeterminedtheremainingactivityafterheatingbactocinsamplesto100。C,121℃,atpH20,50,70,respectivelyTheantimi
7、crobialactivitywasreducedby143%,316%,100%for100CtreatmentatpH20,50,70ThedatashowedthatLactocinAHwasheatstableatlowpHFordeterminedthesensitivityenzymesonLactocinAH,onemlbacterocinsampleWasincubatedfor2hinthepresenceof1mg/
8、mlTrypsinChymotrypsin,PepsinandPapain,respectivelyTheremainingactivityindicatedthatLactocinAHWassensitivetoTrypsinandChymotrypsin,butinsensitivetoPapainTheabilityofLactocinAHtoadsorbtotheproducerstrainWasdeterminedbyusin
9、gthemethodofYANGeta1(1992)TheresultindicatednoadhesionofbacteriocintotheproducercellsTheantimicrobialactivityofLactocinAHWastestedagainstvariousGram—negativeandGram—positivebacteriaTheresultshowedthatLactocinAHWasactivea
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