血壓波動(dòng)性增高促動(dòng)脈血栓形成的作用及氫鹽水的干預(yù).pdf

1、背景：
　　血壓波動(dòng)性（blood pressure variability,BPV）增高是高血壓血栓形成相關(guān)缺血性靶器官損傷，如心肌梗死、缺血性中風(fēng)等的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。去竇弓神經(jīng)（sinoaortic denervation，SAD）大鼠為單純性BPV增高的動(dòng)物模型。前期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，BPV增高可導(dǎo)致氧化應(yīng)激和血小板的活化，這可能會(huì)促進(jìn)動(dòng)脈血栓形成。因而本實(shí)驗(yàn)提出假說(shuō)：BPV增高可能具有促動(dòng)脈血栓形成的作用，氫鹽水可通過(guò)抗氧化應(yīng)激

2、產(chǎn)生干預(yù)效果。
　　目的：
　　明確BPV增高促動(dòng)脈血栓形成的作用以及氫鹽水的干預(yù)效果。
　　方法：
　　實(shí)驗(yàn)分為假手術(shù)（Sham）組、SAD組、SAD+氫鹽水(5ml·kg-1·d-1)組、SAD+氫鹽水（10ml·kg-1·d-1）組和SAD+VC（250ml·kg-1·d-1）組。Sham組和SAD組n=14，其他各組n=8。SAD模型制作手術(shù)后4周，Sham組和SAD組隨機(jī)各取6只大鼠，分別股動(dòng)、靜脈插管

3、，應(yīng)用清醒大鼠血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)手段，檢測(cè)大鼠腹主動(dòng)脈的收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、平均壓(MBP)、收縮壓波動(dòng)性(SBPV)、舒張壓波動(dòng)性(DBPV)、平均壓波動(dòng)性(MBPV)和壓力感受性敏感性(BRS)變化。其他動(dòng)物分別腹腔注射生理鹽水（Sham組和SAD組）、氫鹽水（SAD+氫鹽水組）或VC（SAD+VC組）4周，之后均應(yīng)用30％FeCl3刺激頸總動(dòng)脈3 min制作血栓模型，多普勒記錄血栓形成時(shí)間。之后心臟取血，應(yīng)用比濁法測(cè)定

4、不同濃度ADP誘導(dǎo)的血小板聚集功能；采用小室灌流技術(shù)測(cè)定低切變率（300s-1）與高切變率（1200s-1）狀態(tài)下血小板對(duì)膠原的黏附率；流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定血小板表面P-選擇素的表達(dá)和血小板內(nèi)Ca2+、NO的平均熒光強(qiáng)度；比色法測(cè)定血漿中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和一氧化氮（NO）的含量；ELISA檢測(cè)血漿中活性氧（ROS）的含量。取血后剪取血栓段頸總動(dòng)脈和對(duì)側(cè)正常頸總動(dòng)脈0.5cm，一部分用于稱取血栓重量，一部分進(jìn)行HE染

5、色觀察血栓形態(tài)。
　　結(jié)果：
　　與Sham組相比，SAD組SBP、DBP和MBP無(wú)顯著性的差異，但SBPV、DBPV和MBPV均顯著性增大，BRS顯著降低，表明SAD大鼠為單純性BPV增高模型且壓力感受性反射功能受損。以上結(jié)果證明SAD大鼠模型制備成功。
　　與Sham組比較，SAD組血栓形成時(shí)間顯著縮短，血流變異性增高，F(xiàn)eCl3刺激后10min、20min的血流量變化（0min血流量與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)時(shí)的差值）顯著變大

6、、血栓濕重顯著增高。血栓段血管HE染色顯示頸總動(dòng)脈管腔內(nèi)充滿血栓。
　　與Sham組比較，SAD組血小板P-選擇素陽(yáng)性表達(dá)率（未加膠原刺激）和膠原誘導(dǎo)的P-選擇素陽(yáng)性表達(dá)率、高切變率（1200s-1）與低切變率（300s-1）時(shí)血小板對(duì)膠原的黏附率、ADP（終濃度分別為30μmol/L、10μmol/L、3μmol/L）誘導(dǎo)的最大血小板聚集率、血漿中ROS、MDA和血小板中Ca2+水平均顯著升高；血漿中NO、SOD和血小板中NO水

7、平顯著降低。
　　與SAD組比較，氫鹽水組和VC組，血栓形成時(shí)間顯著延長(zhǎng)、血流變異性和FeCl3刺激后10min、20min的血流量變化顯著減小、血栓濕重顯著降低；血小板P-選擇素陽(yáng)性表達(dá)率（未加膠原刺激）和膠原誘導(dǎo)的P-選擇素陽(yáng)性表達(dá)率、高切變率（1200s-1）與低切變率（300s-1）時(shí)血小板對(duì)膠原的黏附率和ADP（終濃度分別為30μmol/L、10μmol/L、3μmol/L）誘導(dǎo)的血小板最大聚集率均顯著性降低；血漿中RO