人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞提取的微囊對大鼠腎缺血再灌注損傷腎組織中HIF-1α表達(dá)的影響.pdf

1、背景及目的：
　　腎缺血再灌注損傷(Renal ischemia reperfusion injury,RIRI)是急性腎動脈阻斷和腎臟移植等臨床治療過程中比較常見的病理生理過程，為腎移植、休克腎、腎部分切除、腎盂積水等疾病的常見并發(fā)癥。缺氧誘導(dǎo)因子-1(hypoxiainduciblefactor，HIF-1)是一種缺氧條件下于人和哺乳動物體內(nèi)廣泛存在的轉(zhuǎn)錄因子，可以激活許多缺氧反應(yīng)性基因的表達(dá)，從而維持細(xì)胞在缺血缺氧狀態(tài)下的生

2、存。作為HIF-1活性的主要控制亞基，HIF-1α在缺血再灌注組織中的表達(dá)頗受關(guān)注。間充質(zhì)干細(xì)胞能夠通過旁分泌或內(nèi)分泌的方式來減輕急慢性腎損害，而目前微囊被人們認(rèn)為是細(xì)胞間彼此交流的重要媒介，能發(fā)揮和干細(xì)胞類似的腎保護(hù)功能。我們實驗小組前期的實驗發(fā)現(xiàn)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（Human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMSCs）提取的微囊(microvesicles,MVs)對急性腎損傷有保護(hù)作用

3、，然而其具體機制尚不完全清楚。因此本實驗希望通過觀察人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞提取的微囊對大鼠腎缺血再灌注損傷后腎組織中缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）表達(dá)的影響，初步探討HIF-1α在人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞提取的微囊發(fā)揮腎保護(hù)作用中可能的機制。
　　方法：
　　健康成年SD雄性大鼠30只，隨機分為假手術(shù)組（Sham組）、缺血再灌注組（ischemia-reperfusion ijury group以下稱IRI組）和微囊治療組（MVs

4、 treatment group，以下稱MVs組），每組10只。采用右腎切除左腎缺血的方法制備腎臟缺血再灌注損傷模型，術(shù)中三組大鼠均切除右腎，IRI組及MVs組術(shù)中予動脈夾夾閉左腎動脈45min后松開，假手術(shù)組模擬手術(shù)操作過程但不夾閉左腎動脈。MVs組手術(shù)同時經(jīng)尾靜脈給予含100ug蛋白量的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（HMSCs）提取的MVs；,缺血再灌注組及Sham組術(shù)中經(jīng)尾靜脈注射等容量生理鹽水；24h后急性處死大鼠立即通過下腔靜脈采血，檢

5、測血Scr、BUN含量并同時切除左腎，取二分之一左腎置入4％多聚甲醛液中固定，以便進(jìn)行切片PAS染色；二分之一左腎保存于-80℃冰箱中，以便采用weston-blot法進(jìn)行檢測各組腎組織HIF-1α表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　與Sham組相比，IRI組腎臟病理損傷較重，表現(xiàn)為不同程度腎小球、腎間質(zhì)充血，腎小管上皮細(xì)胞水腫、細(xì)胞內(nèi)玻璃樣變及脂肪變性，腎小管腔內(nèi)蛋白管型明顯，HIF-1α表達(dá)及血Scr、BUN水平表達(dá)明顯升高，差

6、異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；而MVs組與Sham組相比較腎臟病理損傷略加重，血Scr、BUN水平表達(dá)略有升高，HIF-1α表達(dá)略有下降，差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；與IRI組比較，MVs組腎臟病理損傷明顯減輕，表現(xiàn)為個別標(biāo)本存在蛋白管型，輕度水腫，血Scr、BUN水平顯著降低，HIF-1α表達(dá)明顯降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.缺血再灌注損傷后腎組織HIF-1α的表達(dá)明顯升高<