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文檔簡介
1、目的:高血脂是AS(動脈粥樣硬化)的高危因子,與心腦血管事件的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切,大量研究表明,長期高血脂可導(dǎo)致血管內(nèi)膜病變和炎癥反應(yīng),導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能障礙,并作為血管病變發(fā)生發(fā)展的共性病理基礎(chǔ)貫穿于疾病的始終。本研究以高脂飲食飼養(yǎng)豚鼠復(fù)制高脂血癥模型,探討中藥復(fù)方清脂膠囊對高脂血癥豚鼠血脂四項和主動脈炎癥因子蛋白表達的影響,為深入研究高血脂與心腦血管疾病發(fā)生之間的內(nèi)在機制,進行初步探索。
方法:將DH豚鼠60只,隨機分為6組,
2、每組10只,雄性。正常組飼喂正常維持飼料,其余各組飼喂高脂飼料,各組動物均自由攝食,飼喂高脂飼料造模2周后開始給藥,陽性對照組給予立普妥(阿托伐他汀鈣片),給藥組分別給予復(fù)方清脂膠囊低、中、高劑量組(0.2、0.4、0.8 g/kg·d-1),連續(xù)給藥4周,給藥期間每周稱量1次體重,末次給藥后禁食不禁水10小時,10%水合氯醛麻醉,腹主動脈取血分離血清(3000轉(zhuǎn),10分鐘);取胸主動脈一部分置液氮冷凍保存,另一部分中性福爾馬林固定。全
3、自動生化分析儀檢測血脂水平及肝功相關(guān)指標(biāo):總膽固醇(CHO)、血清甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)。HE染色光鏡下觀察主動脈組織的病理變化,Western Blot法檢測豚鼠胸主動脈組織中IL-6、 IL-10、IL-1β、TNF-α、粘附分子-1(ICAM-1)蛋白表達水平。
結(jié)果:
1、各組豚鼠一般狀況及體重變化
4、與正常對照組相比,高脂飼養(yǎng)組豚鼠一般狀況良好,個別動物出現(xiàn)食欲下降,體重增速緩慢,各組體重較正常組均有所增加,但各組間未出現(xiàn)顯著性差異(P>0.05)。
2、血清中血脂四項和肝功能的變化
與正常組比較,模型對照組豚鼠總膽固醇(CHO)、血清甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)血水平均出現(xiàn)顯著升高(P<0.05),高密度脂蛋白(HDL)出現(xiàn)一定幅度的下降,但
5、未出現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。
與模型組比較,陽性對照組和復(fù)方清脂膠囊組總膽固醇(CHO)、血清甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)均出現(xiàn)顯著降低(P<0.05),丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和高密度脂蛋白(HDL)亦出現(xiàn)不同程度的改善,但未出現(xiàn)顯著性差異(P>0.05)。
3、主動脈內(nèi)皮細胞形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果
正常對照組:主動脈血管壁結(jié)構(gòu)清晰,內(nèi)膜連續(xù)平滑,中層平滑肌細胞排
6、列均勻、有序、厚度正常,中膜彈性纖維鏡下可見,平滑肌細胞未見增生增多。模型對照組:內(nèi)皮細胞腫脹增生,內(nèi)膜下平滑肌腫脹增生,中層細胞排列紊亂,紋路不清晰。陽性對照組:內(nèi)皮細胞可見腫脹,血管壁層次清晰,中膜可見腫脹。復(fù)方清脂膠囊高劑量組:內(nèi)皮細胞略有腫脹,血管壁層次清晰,內(nèi)彈性膜及中膜彈性纖維明顯可見。復(fù)方清脂膠囊中劑量組:內(nèi)皮細胞略有腫脹并伴有數(shù)量增加,血管壁層次清晰,中膜可見輕度腫脹。復(fù)方清脂膠囊低劑量組:內(nèi)皮細胞明顯增多,成密集排列,
7、內(nèi)膜基本連續(xù)。
4、動脈血管組織內(nèi)炎癥因子的蛋白表達
與正常組比較,模型對照組豚鼠主動脈組織中IL-6、IL-1β、TNF-α、粘附分子-1(ICAM-1)蛋白表達水平均顯著增加(P<0.05),IL-10的表達顯著下降(P<0.05),說明高脂血癥動物模型成功,滿足實驗要求。
與模型組比較,陽性對照組(立普妥)和復(fù)方清脂膠囊可顯著降低IL-6、IL-1β、TNF-α、粘附分子-1(ICAM-1)蛋白表達水
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