TRIM家族蛋白：TRIM22、TRIM14抑制流感病毒的功能和機(jī)制的初步研究.pdf

1、流感病毒(influenza virus)是一種流行廣泛、傳染性極強(qiáng)的負(fù)鏈病毒，可在高危人群中造成嚴(yán)重疾病和死亡。每年流感在世界范圍內(nèi)的流行造成約300萬(wàn)至500萬(wàn)例嚴(yán)重疾病和約25萬(wàn)至50萬(wàn)例死亡。流感病毒分為A、B、C三型，其中A型流感病毒(influenza A virus，IAV)致病性最強(qiáng)。目前治療流感的藥物有NA的抑制劑扎那米韋、奧司米韋，及針對(duì)M2的抑制劑金剛烷胺，但是流感病毒通常會(huì)對(duì)藥物產(chǎn)生耐藥性。雖然疫苗能夠預(yù)防病毒感

2、染，但流感病毒每年流行的毒株都不一樣而且病毒的突變性很強(qiáng)容易導(dǎo)致疫苗錯(cuò)配，單純靠疫苗預(yù)防感染并不現(xiàn)實(shí)。因此，有必要尋找新的抑制流感病毒的機(jī)制，為新藥物的研發(fā)提供線索。
　　在固有免疫對(duì)抗流感病毒感染過(guò)程中干擾素發(fā)揮了重要作用。干擾素能夠誘導(dǎo)表達(dá)ISG(interferon-stimulated gene)。ISG通過(guò)改變細(xì)胞的代謝和內(nèi)環(huán)境來(lái)調(diào)節(jié)機(jī)體免疫反應(yīng)或者與病毒的某些組分發(fā)生直接的相互作用來(lái)抑制病毒的復(fù)制。這些ISG中包括較多

3、的TRIM蛋白，TRIM蛋白家族是由N端到C端以RING、B-box、Coiled-coil結(jié)構(gòu)域依次排列為結(jié)構(gòu)特征的一類蛋白，TRIM14和TRIM22屬于TRIM(tripartite motif)家族成員。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一些TRIM蛋白能夠抑制HBV、HIV、IAV等多種病毒，但TRIM14與流感病毒的關(guān)系還不清楚。
　　本研究以TRIM22為研究對(duì)象來(lái)驗(yàn)證BiLC系統(tǒng)能否快速有效的檢測(cè)ISGs蛋白與流感蛋白相互作用;同時(shí)建立

4、了穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系的構(gòu)建方法及快速檢測(cè)流感病毒復(fù)制的系統(tǒng)。與文獻(xiàn)報(bào)道一致，TRIM22能有效抑制流感病毒的復(fù)制，并且BiLC系統(tǒng)檢測(cè)到TRIM22與NP蛋白有特異的結(jié)合?；谏鲜鰧?shí)驗(yàn)方法，我們研究了TRIM14與流感病毒的關(guān)系。發(fā)現(xiàn)TRIM14屬于ISG并且主要被Ⅰ型干擾素誘導(dǎo)高表達(dá)。過(guò)表達(dá)TRIM14和敲除內(nèi)源TRIM14細(xì)胞的病毒擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)都證明TRIM14對(duì)流感病毒具有抑制作用。利用高效BiLC系統(tǒng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)TRIM14可能通過(guò)與M2、