保存時(shí)間和溫度對(duì)未固定胸腹水細(xì)胞形態(tài)、數(shù)量和退變率的影響.pdf

1、目的：
　　隨著胸腹水細(xì)胞學(xué)診斷的廣泛應(yīng)用，如何減少漏診、誤診，提高診斷陽(yáng)性率具有重要的實(shí)際意義，正確保存、及時(shí)送檢及合理固定是保證細(xì)胞學(xué)診斷正確性的重要前提。但臨床實(shí)踐中由于種種原因，經(jīng)常出現(xiàn)標(biāo)本保存不良、送檢不及時(shí)等問題，為探討保存時(shí)間和保存溫度對(duì)細(xì)胞學(xué)診斷的影響，本研究對(duì)未固定離體胸腹水在不同保存溫度和時(shí)間下制作的常規(guī)細(xì)胞學(xué)涂片和細(xì)胞團(tuán)石蠟切片進(jìn)行觀察，對(duì)單核細(xì)胞、間皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征、高倍視野下平均細(xì)胞數(shù)、細(xì)胞退

2、變情況進(jìn)行綜合分析，為胸腹水細(xì)胞的保存溫度和細(xì)胞涂片及細(xì)胞蠟塊的最佳制作時(shí)機(jī)提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　收集河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院病理科2015-2016年間送檢的胸水和腹水標(biāo)本30例，所有胸腹水全部即時(shí)送檢，每例新鮮標(biāo)本充分混勻后分成18份，每份10ml,置密閉離心管中，2份標(biāo)本立即離心，分別制作細(xì)胞涂片和細(xì)胞蠟塊，記為對(duì)照組。剩余16份標(biāo)本分為兩組，8份為冷藏環(huán)境組（4℃）、8份為室溫環(huán)境組(24℃)。兩實(shí)驗(yàn)組分別在6

3、h、24h、48h、72h四個(gè)時(shí)間段取樣，3000rpm離心10min，各涂片2張，沉渣細(xì)胞制備細(xì)胞蠟塊，常規(guī)切片、HE染色。
　　結(jié)果：
　　1、細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察可見對(duì)照組細(xì)胞涂片及細(xì)胞團(tuán)石蠟切片細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，可以分辨細(xì)胞類型。隨著保存時(shí)間延長(zhǎng)，細(xì)胞出現(xiàn)一系列退行性改變，或表現(xiàn)為細(xì)胞體積增大，細(xì)胞核染色逐漸變淺，染色質(zhì)及核膜結(jié)構(gòu)變模糊，難以辨別細(xì)胞形態(tài)；或表現(xiàn)為細(xì)胞體積縮小，細(xì)胞核固縮，細(xì)胞質(zhì)變紅。細(xì)胞團(tuán)石蠟切片HE染色

4、切片中組織結(jié)構(gòu)也隨保存時(shí)間的延長(zhǎng)而消失，成為無法辨認(rèn)的退變細(xì)胞團(tuán)。在相同保存時(shí)間，冷藏環(huán)境組細(xì)胞形態(tài)變化較室溫環(huán)境組略好。
　　2、細(xì)胞涂片每高倍視野平均細(xì)胞數(shù)觀察結(jié)果表明，在0-72小時(shí)的范圍內(nèi)，隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)，未固定胸腹水細(xì)胞涂片中平均細(xì)胞數(shù)逐漸減少（室溫環(huán)境r=-0.321，P＜0.05；冷藏環(huán)境r=-0.357，P＜0.05）。室溫及冷藏48h、72h組的平均細(xì)胞數(shù)均低于對(duì)照組（P＜0.05），而室溫及冷藏6h、24h

5、組的平均細(xì)胞數(shù)與對(duì)照組相比無明顯差異。在相同保存時(shí)間，冷藏環(huán)境組與室溫環(huán)境組相比，無顯著差異。
　　3、在0-72小時(shí)的范圍內(nèi)，隨保存時(shí)間延長(zhǎng)，在室溫環(huán)境及冷藏環(huán)境下未固定胸腹水細(xì)胞的涂片中細(xì)胞退變率均逐漸升高（室溫環(huán)境r=0.850，P＜0.05；冷藏環(huán)境r=0.654，P＜0.05）。室溫及冷藏6h、24h、48h、72h組的細(xì)胞退變率均高于對(duì)照組（P＜0.05）。冷藏環(huán)境組與室溫環(huán)境組在6h的細(xì)胞退變率相比，冷藏6h組低于室

6、溫6h組（P＜0.05）。冷藏環(huán)境組與室溫環(huán)境組在24h、48h、72h的細(xì)胞退變率相比無明顯差異。
　　4、30例未固定胸腹水樣本在實(shí)驗(yàn)期內(nèi)有4例標(biāo)本出現(xiàn)細(xì)菌污染而不能觀察，占樣本總數(shù)的13.33％。在室溫環(huán)境下24h檢出2例、48h1例、72h1例；而在冷藏24h檢出1例、48h1例、72h2例。可見冷藏環(huán)境下污染出現(xiàn)較晚。
　　結(jié)論：
　　1、在0-72小時(shí)的范圍內(nèi)，隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)，室溫環(huán)境及冷藏環(huán)境下未固定