APOBEC3B基因在乙肝相關(guān)性肝癌中的功能研究.pdf

1、肝細(xì)胞癌是肝臟原發(fā)性惡性腫瘤，主要發(fā)生于原發(fā)性肝細(xì)胞損傷和肝硬化患者中，是全球范圍內(nèi)的最主要的癌癥之一，由于乙型肝炎病毒(HBV)感染的流行，肝細(xì)胞癌在我國的形勢尤為嚴(yán)峻。
　　A3B是七種APOBEC3脫氨酶家族中的一員，它負(fù)責(zé)針對多種DNA病毒的先天性免疫應(yīng)答以及適應(yīng)性免疫應(yīng)答，所有這類酶均表現(xiàn)出DNA脫氨酶活性。近期研究證據(jù)提示APOBEC3B(A3B)作為一種DNA酶，是乳腺癌，宮頸癌、膀胱癌等多種癌癥中出現(xiàn)基因突變的原因

2、之一。例如，最近的研究顯示在大多數(shù)乳腺癌細(xì)胞系中A3B的表達(dá)水平普遍升高，且更具活性，并且提示A3B在乳腺癌組織中表達(dá)水平的升高與C-T突變的增加以及堿基替換具有明確關(guān)聯(lián)。更引人注目的是，轉(zhuǎn)基因小鼠或兔在肝組織中的APOBEC1高表達(dá)可誘導(dǎo)肝臟腫瘤形成和細(xì)胞轉(zhuǎn)化，提示胞苷脫氨酶家族與肝癌的發(fā)生之間存在著某種關(guān)聯(lián)，但其機(jī)制并未闡明。近期研究顯示，A3B在肝癌中的高表達(dá)與腫瘤衛(wèi)星灶的形成、血管侵犯、周圍肝組織的侵襲以及更高的腫瘤分期顯著相關(guān)

3、，但其機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。
　　目的:
　　旨在揭示A3B在人類乙肝相關(guān)性肝細(xì)胞癌(HBV-HCC)中的功能。
　　方法：
　　我們回顧性分析了205例在2005-2015年期間單中心行肝葉切除術(shù)的HBV-HCC患者，所有患者診斷均經(jīng)病理組織學(xué)證實，患者隨訪記錄包括臨床病理指標(biāo)、無復(fù)發(fā)生存期(RFS)以及總生存期(OS)。通過免疫組織化學(xué)染色半定量分析腫瘤組織及癌旁肝組織中的A3B蛋白表達(dá)水平。A3B表達(dá)水平的臨

4、床病理變量之間的相關(guān)顯著性使用Logistic回歸分析和卡方檢驗進(jìn)行驗證?；颊呱媲€通過Kaplan-Meier進(jìn)行檢驗。使用Cox回歸模型進(jìn)行擬合，以分析預(yù)后因素對RFS的影響。
　　結(jié)果:
　　在肝癌組織及癌旁組織中均可見A3B蛋白的表達(dá)，且癌組織中的表達(dá)水平顯著高于癌旁組織(p=0.004)。臨床病理分析表明，A3B表達(dá)水平與腫瘤大小(p=0.038)以及腫瘤的T分期(p=0.010)顯著相關(guān)。A3B的表達(dá)水平與總生

5、存率(p=0.788)以及無復(fù)發(fā)生存率(p=0.341)無明顯相關(guān)性。
　　此外，我們還通過qPCR測定了不同肝細(xì)胞癌細(xì)胞系中的A3B的表達(dá)，顯示在不同肝細(xì)胞癌細(xì)胞系中呈現(xiàn)出不同的A3B表達(dá)水平。另外，在體外實驗中，我們使用A3B全長質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞株，檢測A3B過表后肝癌細(xì)胞生長以及遷移能力。結(jié)果顯示，相對于瞬時轉(zhuǎn)染空載的肝癌細(xì)胞相比，在瞬時轉(zhuǎn)染A3B全長質(zhì)粒的肝癌細(xì)胞中顯示出更強的增殖能力以及遷移能力。
　　結(jié)論：<