AKT和Wnt11雙基因聯(lián)合小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療心肌梗死的機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討AKT基因過表達(dá)對過氧化氫（H2O2）誘導(dǎo)的小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞氧化損傷的影響及抗凋亡作用。探討Wnt11基因過表達(dá)對干細(xì)胞向心肌細(xì)胞轉(zhuǎn)化是否有促進(jìn)作用。研究轉(zhuǎn)染雙基因的干細(xì)胞與心肌細(xì)胞共培養(yǎng)后是否可轉(zhuǎn)化為心肌細(xì)胞。
　　方法:培養(yǎng)干細(xì)胞，測慢病毒對干細(xì)胞最佳感染率。培養(yǎng)干細(xì)胞，轉(zhuǎn)染AKT基因，向細(xì)胞培養(yǎng)基中加入不同濃度（25、50、100、200umol/L）的H2O2，培養(yǎng)24h建立氧化損傷模型，每個(gè)模型組均包含AK

2、T組、GFP對照組、AKT抑制劑組。細(xì)胞流式儀檢測干細(xì)胞凋亡比例。培養(yǎng)干細(xì)胞，轉(zhuǎn)染AKT基因，缺血缺氧條件下培養(yǎng)，并設(shè)對照組。24h后細(xì)胞流式儀檢測干細(xì)胞凋亡比例。培養(yǎng)干細(xì)胞,轉(zhuǎn)染W(wǎng)nt11基因，細(xì)胞免疫熒光法檢測是否有心肌細(xì)胞標(biāo)志蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞，與心肌細(xì)胞共培養(yǎng)并觀察記錄。
　　結(jié)果:干細(xì)胞凋亡率隨H2O2濃度上升而呈上升趨勢。25、50umol組凋亡率均低于對照組（P<0.05），100umol組的凋亡率略高于空白對照組（P