半夏及干姜人參半夏復方對小鼠原腸胚相關(guān)蛋白表達的影響.pdf

1、做好胎兒保健是健康生命的基礎(chǔ)，妊娠期用藥是胎兒保健中的重要內(nèi)容，隨著中醫(yī)藥的發(fā)展，妊娠期中藥的應用越來越廣泛，中藥妊娠毒性也受到越來越多的關(guān)注。半夏因其燥濕化痰、降逆止嘔的功效良好，在妊娠惡阻、妊娠咳嗽、妊娠眩暈等疾病的治療中發(fā)揮重要作用，但古代文獻記載中它在妊娠期應用的安全性還存有爭議，現(xiàn)代實驗研究表明生半夏有妊娠毒性。干姜人參半夏復方為治療妊娠惡阻的名方，文獻中未見關(guān)于其妊娠毒性的記載，且其療效在臨床得到驗證[1]。半夏妊娠毒性的作

2、用機制是什么？干姜人參半夏復方為何能解半夏毒性？本實驗采用免疫印跡(Western Blot)方法檢測半夏及干姜人參半夏復方對于小鼠原腸胚相關(guān)蛋白表達的影響，以探索半夏妊娠毒性與纖維蛋白原β(FGB)、α-微管蛋白(α-Tubulin)、鈣調(diào)蛋白(CaM)表達是否有關(guān)，研究干姜人參半夏復方解毒與上述蛋白表達的關(guān)系。
　　目的:
　　將半夏及干姜人參半夏復方分別以粉劑及煎劑形式作用于小鼠妊娠早期，取妊娠小鼠胚胎組織，檢測胚胎中

3、FGB、α-Tubulin、CaM表達水平，以探究半夏妊娠毒性與FGB、α-Tubulin、CaM表達是否有關(guān)，研究干姜人參半夏復方解毒與上述蛋白表達的關(guān)系。
　　方法:
　　妊娠小鼠分為正常對照組、生半夏粉組、生半夏湯組、干姜人參半夏粉組、干姜人參半夏湯組。在妊娠第6天開始灌胃，連續(xù)灌胃3天。正常對照組每只小鼠灌胃蒸餾水0.4ml/天，生半夏粉組每只小鼠灌胃0.17g/ml生半夏混懸液0.4ml/天，生半夏湯組每只小鼠灌胃

4、0.17g/ml生半夏湯0.4ml/天，干姜人參半夏粉組每只小鼠灌胃0.21g/ml干姜人參半夏混懸液0.8ml/天（分兩次，每次0.4ml），干姜人參半夏湯組每只小鼠灌胃0.43g/ml干姜人參半夏湯0.4ml/天。在妊娠第9天脫頸椎處死孕鼠，剝離完整胚胎組織并凍存，提取胚胎組織全蛋白并用Western Blot方法檢測胚胎組織中FGB、α-Tubulin、CaM表達水平。
　　結(jié)果:
　　1.纖維蛋白原(FGB)表達:生

5、半夏粉組、生半夏湯組、干姜人參半夏粉組比正常對照組低，且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，干姜人參半夏湯組與正常對照組相比差異無統(tǒng)計學意義;組間比較生半夏粉組與生半夏湯組差異無統(tǒng)計學意義，干姜人參半夏粉組比干姜人參半夏湯組表達水平低且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，生半夏粉組與干姜人參半夏粉組差異無統(tǒng)計學意義，生半夏湯組比干姜人參半夏湯組表達水平低且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　2.α-微管蛋白（α-Tubulin）表

6、達:各用藥組與正常對照組相比差異均無統(tǒng)計學意義;組間比較生半夏粉組與生半夏湯組差異無統(tǒng)計學意義，干姜人參半夏粉組比干姜人參半夏湯組表達水平低且差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），生半夏粉組與干姜人參半夏粉組差異無統(tǒng)計學意義，生半夏湯組比干姜人參半夏湯組表達水平低且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　3.鈣調(diào)蛋白(CaM)表達:生半夏粉組、生半夏湯組比正常對照組表達水平低，且有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，干姜人參半夏粉組、干姜人參

7、半夏湯組比正常對照組表達水平高，且有統(tǒng)計學差異(P＜0.01);組間比較生半夏粉組與生半夏湯組差異無統(tǒng)計學意義，干姜人參半夏粉組與干姜人參半夏湯組差異無統(tǒng)計學意義，生半夏粉組比干姜人參半夏粉組表達水平低且差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），生半夏湯組比干姜人參半夏湯組表達水平低且差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。
　　結(jié)論:
　　1.生半夏粉、生半夏湯、干姜人參半夏粉對小鼠原腸胚纖維蛋白原表達有抑制作用;干姜人參半夏復方對小鼠

8、原腸胚纖維蛋白原表達的影響與配伍及煎煮都相關(guān)。
　　2.生半夏粉、生半夏湯、干姜人參半夏粉、干姜人參半夏湯對小鼠原腸胚α-微管蛋白表達無明顯影響。
　　3.生半夏粉、生半夏湯對小鼠原腸胚鈣調(diào)蛋白表達有抑制作用;干姜人參半夏粉、干姜人參半夏湯對小鼠原腸胚鈣調(diào)蛋白表達有增強作用;干姜人參半夏復方對小鼠原腸胚鈣調(diào)蛋白表達的影響與配伍相關(guān)。
　　4.半夏妊娠毒性作用與抑制纖維蛋白原和鈣調(diào)蛋白表達，從而導致胚胎出血、淤血，細胞分