辛二酰苯胺異羥肟酸單獨及聯(lián)合紫杉醇對人卵巢癌細胞株OC3的殺傷與自噬.pdf

1、卵巢癌是婦科常見的惡性腫瘤。手術及化療現仍是治療卵巢癌的主要方法。紫杉醇(Paclitaxel，PTX)是目前治療卵巢癌化療的首選基礎用藥，研究發(fā)現該藥除可抑制腫瘤外，還可引起腫瘤細胞自噬的發(fā)生。目前治療上皮性卵巢癌仍是采用紫杉醇聯(lián)合鉑類藥物，但鉑類藥物的耐藥始終影響著卵巢癌的治療效果，故以紫杉醇為核心的聯(lián)合治療方案現已成為治療卵巢癌領域的新熱點。
　　辛二酰苯胺異羥肟酸（suberoylanilide hydroxamic ac

2、id，SAHA）屬組蛋白去乙?；敢种苿?HDAC inhibitor，HDACI)中異羥肟酸類，是現今HDACI中最具代表性藥物。研究表明SAHA可介導組蛋白去乙?；?histone deacetylase，HDAC)異常表達的基因，起到抗腫瘤作用。SAHA除對許多實體瘤及血液系統(tǒng)腫瘤具有高效殺傷作用外還可與多種化療藥物聯(lián)用發(fā)揮協(xié)同效應，并具有誘導細胞分化，促進細胞凋亡，引發(fā)細胞自噬等作用。現已獲批應用于臨床治療。新近研究表明，腫瘤

3、的發(fā)生發(fā)展與自噬密切相關。本研究擬通過觀察SAHA單獨及聯(lián)合PTX對人卵巢癌細胞株OC3殺傷效應及自噬的影響，為卵巢癌治療提供新的實驗依據。
　　本實驗通過培養(yǎng)人卵巢癌細胞株OC3，經MTT法檢測SAHA、單獨及聯(lián)合PTX應用是否對OC3細胞具有抑制細胞增殖作用，采用倒置顯微鏡、透射電子顯微鏡及瑞士-吉姆薩染色檢測OC3細胞經SAHA、PTX單獨及聯(lián)合應用處理后，細胞形態(tài)的變化，細胞超微結構的改變，應用AO/EB雙染色法檢測各組間

4、細胞酸性囊泡的變化，并用Q-PCR進一步檢測細胞自噬相關基因ARHI及Beclin-1的表達變化，流式細胞術檢測自噬相關蛋白LC3B的表達變化，以及Western-blot檢測自噬蛋白Beclin-1的表達。
　　結果表明: SAHA聯(lián)合PTX組較兩藥單獨組，應用于人卵巢癌細胞株OC3具有顯著抑制細胞增殖的作用(P＜0.05)，并存在時間和劑量效應關系;聯(lián)合用藥組細胞形態(tài)改變明顯，細胞超微結構發(fā)生顯著改變，自噬小體出現增多，酸性囊

5、泡亦增多;Q-PCR結果顯示，SAHA聯(lián)合PTX較各自單獨用藥組可明顯增強ARHI及Beclin-1基因表達(P＜0.05)，流式細胞術檢測SAHA單藥組LC3 B蛋白表達量增高并與藥物濃度呈正相關(P＜0.05)，Western-blot結果證實，SAHA聯(lián)合PTX較各自單獨組Beclin-1蛋白表達顯著增強。
　　結論:上述研究結果提示SAHA單獨及聯(lián)合PTX具有抑制人卵巢癌細胞株OC3增殖的作用，并可誘導自噬發(fā)生，兩藥聯(lián)合應