Shh和Gli-1在人腦膠質(zhì)瘤中表達及其相關(guān)性的實驗研究.pdf

1、目的：探討SHH（Sonic Hedgehog Signaling Pathway）信號通路起始因子Shh、核轉(zhuǎn)錄因子Gli-1在不同級別星形膠質(zhì)細胞瘤及正常腦組織中表達及相關(guān)性。
　　方法：
　　1、收集2014年5月至2015年5月河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院神經(jīng)外科手術(shù)組織標(biāo)本：星形膠質(zhì)瘤組織50例（其中高級別膠質(zhì)瘤36例、低級別膠質(zhì)瘤14例）及正常腦組10例，經(jīng)甲醛固定。星形膠質(zhì)瘤標(biāo)本20例（高級別膠質(zhì)瘤、低級別膠質(zhì)瘤各10

2、例）、正常腦組織標(biāo)本8例，-80℃冰箱凍存（正常腦組織標(biāo)本來自神經(jīng)外科顱腦損傷患者，術(shù)前已告知患者家屬標(biāo)本用途并取得患者家屬同意）。
　　2、依據(jù)WHO中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)，定義高級別膠質(zhì)瘤為WHO分級Ⅲ~Ⅳ級，低級別膠質(zhì)瘤為Ⅰ~Ⅱ級。
　　3、應(yīng)用免疫組織化學(xué)（Immumohistochemistory）SP法檢測Shh及Gli-1在各組織中的表達情況。
　　4、應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）技術(shù)檢測S

3、hh及Gli-1 mRNA在各組織中表達情況。
　　5、運用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS21.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　1、免疫組化結(jié)果表明：Shh陽性信號定位于細胞胞膜、胞質(zhì)；Gli-1陽性信號定位于細胞胞質(zhì)、胞核。在高級別膠質(zhì)瘤中Shh的陽性表達率為61.1％（22/36），低級別膠質(zhì)瘤中Shh的陽性表達率為57.1%（8/14），正常腦組織中 Shh的陽性表達率為10%（1/10），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。在高級

4、別膠質(zhì)瘤中Gli-1的陽性表達率為69.4%（25/36），低級別膠質(zhì)瘤中Gli-1的陽性表達率為28.6%（4/14），正常腦組織中Gli-1的陽性表達率為10%（1/10），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。其中，兩兩對比，高級別膠質(zhì)瘤與低級別膠質(zhì)瘤中Shh的陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義；高級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織、低級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織中Shh的陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義。高級別膠質(zhì)瘤與低級別膠質(zhì)瘤、高級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織中Gli-1的陽性率對比有統(tǒng)計學(xué)

5、意義；低級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織中Gli-1的陽性率對比無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2、RT-PCR結(jié)果表明：在高級別膠質(zhì)瘤中 Shh mRNA的相對表達量為0.126±0.020，低級別膠質(zhì)瘤中Shh mRNA的相對表達量為0.113±0.045，正常腦組織中Shh mRNA的相對表達量為0.061±0.039，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。在高級別膠質(zhì)瘤中Gli-1 mRNA的相對表達量為0.141±0.032，低級別膠質(zhì)瘤中 Gli-1 mRNA

6、的相對表達量為0.074±0.044，正常腦組織中Gli-1 mRNA的相對表達量為0.040±0.024，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。其中，兩兩對比，高級別膠質(zhì)瘤與低級別膠質(zhì)瘤間Shh mRNA相對表達量無統(tǒng)計學(xué)意義；高級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織、低級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織間Shh mRNA相對表達量有統(tǒng)計學(xué)意義。高級別膠質(zhì)瘤與低級別膠質(zhì)瘤、高級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織間Gli-1 mRNA的相對表達量有統(tǒng)計學(xué)意義；低級別膠質(zhì)瘤與正常腦組織間相對表達量無

7、統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3、Shh與Gli-1相關(guān)性統(tǒng)計：在免疫組化中，Shh與Gli-1相關(guān)系數(shù)為：0.926（P＜0.05）；在PCR中，Shh與Gli-1相關(guān)系數(shù)為：0.588（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、Shh、Gli-1在膠質(zhì)瘤中的表達顯著高于正常腦組織，提示SHH信號通路在膠質(zhì)瘤細胞中是普遍激活的。
　　2、Shh與Gli-1的表達在免疫組化及PCR中均成線性相關(guān)，提示Shh、Gli-1共同參與了