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文檔簡介
1、艾滋病(即獲得性免疫缺陷綜合癥(AIDS,acquired immunodeficiencysyndrome)),是由人類免疫缺陷病毒(HIV,human immunodeficiency virus)引起的致死性疾病[1]。天然產(chǎn)物的抗艾滋病研究也悄然而起且日益增多,從豐富的中藥資源中篩選出有效的抗艾滋病藥物,進(jìn)一步篩選有效成分及活性部位也成為當(dāng)前抗艾滋病藥物研發(fā)的一個熱點(diǎn)。
將多種中藥提取物依據(jù)毒性大小配伍并結(jié)合補(bǔ)益類中藥
2、,更好地發(fā)揮組方抗HIV-1的作用,這可成為中藥復(fù)方制劑一個新的切入點(diǎn)。
目的:
1、研究中藥提取物鴉膽子石油醚(1號提取物)、榧子石油醚(2號提取物)、牽牛子石油醚(3號提取物)、牽牛子氯仿(4號提取物)、牽牛子正丁醇(5提取物)的急性毒性,為藥用提取物的的開發(fā)提供安全性評價基礎(chǔ),為提取物復(fù)方制劑的研究探索引入新的切入點(diǎn)。
2、研究多種中藥提取物急性毒性,依據(jù)毒性大小配伍并結(jié)合補(bǔ)益類中藥,探索如何更有效地
3、發(fā)揮中藥提取物組方抗HIV-1的作用。
方法:
1、中藥提取物鴉膽子石油醚(1號提取物)、榧子石油醚(2號提取物)的急性毒性試驗(yàn)是進(jìn)行最大耐受量測定,連續(xù)觀察14天動物的體重,死亡,一般狀態(tài)和毒性體征;3號、4號、5號提取物采用急性毒性替代法上下法,連續(xù)觀察14天以上動物的體重,死亡,一般狀態(tài)和毒性體征,通過AOT425StatPgm程序計(jì)算出LD50值及相應(yīng)的95%可信區(qū)間。
2、通過實(shí)時熒光定量方法(R
4、T-PCR)進(jìn)行各提取物及不同組方的量效關(guān)系比較。
結(jié)果:
1、急性毒性試驗(yàn)中,1號提取物和2號提取物進(jìn)行最大耐受量(MTD)試驗(yàn)時,未觀察到動物死亡、運(yùn)動行為,反射、自主運(yùn)動、毛發(fā)等異常表現(xiàn),且1號提取物和2號提取物的MTD以生藥計(jì)分別為2900g/kg、21000g/kg。3號、4號、5號提取物均表現(xiàn)出一定毒性癥狀,3號、4號、5號提取物的半數(shù)致死量(LD50)分別是3758mg/kg、325.5mg/kg、10
5、98mg/kg,表明3種提取物對小鼠的急性毒性大小:4號提取物>5號提取物>3號提取物。
2、量效關(guān)系比較中,依毒性大小配伍的B組方對HIV-1的抑制作用強(qiáng)于按均等比例配伍的C組方對HIV-1的抑制作用。但無論按急性毒性配伍的B組方,還是按均等比例配伍的C組方,與所有單味提取物比較,特別是與對HIV-1有顯著的抑制效果的3號提取物比較,在劑量1ug/ml~16ug/ml間,組方對HIV-1抑制效果多弱于3號提取物或與3號提取物
6、等效。加入適量淫羊藿和人參補(bǔ)益類中藥配伍后,BR組方(即加入人參的B組方)和A組方(加入淫羊藿的B組方)與3號提取物的細(xì)胞內(nèi)HIVRNA表達(dá)量在濃度0.25ug/ml~16ug/ml間未有顯著差異,AR組方(即加入淫羊藿和人參的B組方)與3號提取物的細(xì)胞內(nèi)HIVRNA表達(dá)量在濃度4ug/ml~16ug/ml濃度間有顯著差異,說明AR組方在4ug/ml~16ug/ml濃度間對HIV-1抑制作用強(qiáng)于3號提取物對HIV-1抑制作用。BR組方、
7、A組方AR組方與3號提取物的上清病毒載量在1ug/ml~16ug/ml間未有顯著差異。但AR組方,細(xì)胞內(nèi)HIVRNA表達(dá)量和上清中病毒載量均呈現(xiàn)低于3號提取物、B組方、BR組方、A組方的趨勢。
結(jié)論:
在小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)中,中藥提取物鴉膽子石油醚(1號提取物)、榧子石油醚(2號提取物)、在文章實(shí)驗(yàn)條件中未表現(xiàn)出明顯急性毒性癥狀。牽牛子石油醚(3號提取物)、牽牛子氯仿(4號提取物)、牽牛子正丁醇(5提取物)均不同程度表
8、現(xiàn)出了急性毒性癥狀。根據(jù)提取物的急性毒性結(jié)果配伍的B組方比按均等比例配伍的C組方對HIV-1的抑制作用作用大,這說明了按提取物毒性大小配伍的B組方是存在合理性的。但B組方、C組方在抑制HIV-1效果上,弱于對HIV-1抑制效果顯著的3號提取物,或與3號提取物等效,這表明組方均未發(fā)揮出明顯抑制HIV-1的協(xié)同作用。加入適量淫羊藿和人參補(bǔ)益類中藥后,BR組方、A組方與3號提取物在細(xì)胞內(nèi)HIVRNA表達(dá)量和上清中病毒載量未有顯著差異,但AR組
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