AKR1B10在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的：肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是我國(guó)常見的惡性腫瘤之一，患者預(yù)后差，術(shù)后復(fù)發(fā)率較高。因此，尋找預(yù)測(cè)HCC術(shù)后早期復(fù)發(fā)的腫瘤標(biāo)志物對(duì)于提高患者的生存率是十分重要的。本課題組前期應(yīng)用iTRAQ結(jié)合2DLC-MS/MS定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)研究廣西地區(qū)人群HCC的差異蛋白質(zhì)譜，發(fā)現(xiàn)醛酮還原酶家族1成員B10（aldo-keto reductase family1 member B10，AKR1B10）蛋

2、白在HCC組織中上調(diào)表達(dá)。本課題擬研究AKR1B10在HCC組織中的表達(dá)，探討HCC組織中AKR1B10的表達(dá)水平與黃曲霉毒素B1（aflatoxin B1，AFB1）暴露的關(guān)系，評(píng)估AKR1B10在預(yù)測(cè)HCC術(shù)后早期復(fù)發(fā)的價(jià)值。
　　方法：1、收集2013年1月至2014年6月在廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院行根治性肝切除術(shù)的124例HCC患者的癌組織、癌旁組織及其組織切片，同時(shí)收集8例肝血管瘤患者的病灶旁的正常肝組織及組織切片作為正

3、常對(duì)照。通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR、免疫組織化學(xué)以及Western Blot等分子生物技術(shù)，在mRNA和蛋白水平檢測(cè)AKR1B10在HCC組織、癌旁組織和正常肝組織中的表達(dá)情況。
　　2、通過檢測(cè)HCC組織P53基因第7外顯子249密碼子的突變鑒定出AFB1暴露相關(guān)性HCC患者。比較AKR1B10 mRNA在AFB1暴露相關(guān)性HCC患者與非AFB1暴露相關(guān)性HCC患者的癌和癌旁組織中的表達(dá)。
　　3、分析HCC組織中AKR1B1

4、0 mRNA的表達(dá)水平與患者臨床病理特征的關(guān)系，并通過生存分析和COX風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估模型分析AKR1B10的表達(dá)水平對(duì)HCC患者術(shù)后2年內(nèi)腫瘤復(fù)發(fā)的影響。
　　結(jié)果：1、實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示，AKR1B10 mRNA在HCC組織中的平均表達(dá)水平明顯高于癌旁組織（P<0.001），且有80.1％的HCC患者癌組織中的AKR1B10 mRNA相對(duì)癌旁組織高表達(dá)；AKR1B10 mRNA在正常肝組織中表達(dá)量較低，明顯低于癌旁組織（P=0

5、.008）。免疫組化顯示，HCC組織中AKR1B10蛋白的陽性率和染色強(qiáng)度均明顯高于癌旁組織（均P＜0.001）。Western Blot結(jié)果也證實(shí)HCC組織中AKR1B10蛋白的表達(dá)高于癌旁組織。
　　2、基因測(cè)序結(jié)果顯示，P53基因第7外顯子249密碼子發(fā)生突變的患者有28例（即AFB1暴露相關(guān)性HCC）；未發(fā)生突變的患者有84例（即非AFB1暴露相關(guān)性HCC）。AKR1B10 mRNA在AFB1暴露相關(guān)性HCC患者的HCC組

6、織和癌旁組織中的表達(dá)水平均明顯高于非AFB1暴露相關(guān)性HCC患者（分別P=0.012，P=0.034）。在AFB1暴露和非AFB1暴露相關(guān)性HCC患者中，AKR1B10 mRNA在癌組織中的表達(dá)水平均明顯高于癌旁組織（均P＜0.001）。
　　3、AKR1B10 mRNA的表達(dá)與血清甲胎蛋白濃度和乙肝病毒DNA的滴度相關(guān)。在血清甲胎蛋白＜200 ng/mL的患者中，有63.7%（33/49）的患者HCC組織中的AKR1B10 mR

7、NA高表達(dá)，明顯高于高于血清甲胎蛋白≥200 ng/mL的患者（P=0.048）。在110例乙肝相關(guān)性HCC患者中，乙肝病毒DNA≥1000IU/ml的患者AKR1B10 mRNA的表達(dá)水平明顯高于乙肝病毒DNA＜1000IU/ml的患者（P=0.046）。生存分析的結(jié)果顯示，AKR1B10 mRNA低表達(dá)的患者在6、12、24個(gè)月的腫瘤復(fù)發(fā)率明顯高于AKR1B10 mRNA高表達(dá)的患者（29.2%、64.6%、73.4%比23.1%、