17β-雌二醇心血管作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、雌激素具有廣泛的生物作用，通過對抗高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、脂質(zhì)過氧化及其他血管損傷發(fā)揮心血管保護(hù)作用。血管內(nèi)皮功能及心肌代謝紊亂是導(dǎo)致心血管疾病發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵病理生理機(jī)制。絕經(jīng)的本質(zhì)是卵巢功能衰竭，機(jī)體雌激素水平驟降。絕經(jīng)前女性心血管疾病的危險(xiǎn)度低于男性，然而絕經(jīng)后其危險(xiǎn)度增加，接近男性。2013年國際絕經(jīng)指南指出，圍絕經(jīng)期和絕經(jīng)早期婦女應(yīng)用絕經(jīng)激素治療(Menopause Hormone Therapy，MHT)具有潛在的心血管保護(hù)作用

2、，但其具體機(jī)制尚不明確。慢性低度炎癥和氧化應(yīng)激是心血管疾病病理生理過程的重要環(huán)節(jié)。單核細(xì)胞趨化因子-1(monocyte chemotactic factor1，MCP-1)可誘導(dǎo)單核細(xì)胞的激活及其在內(nèi)皮下的聚集，是動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)鍵因子。MCP-1可誘導(dǎo)和調(diào)節(jié)其它炎性因子的形成與釋放，從而形成級聯(lián)反應(yīng)，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，因而被認(rèn)為是炎癥反應(yīng)的啟動(dòng)因子。RhoA屬于Rho鳥苷三磷酸酶家族，在維持血管內(nèi)皮及心肌細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)、調(diào)控細(xì)胞遷移發(fā)揮重

3、要作用。近年來研究表明沉默調(diào)節(jié)蛋白1(silence regulating protein1，SIRT1)可抑制氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡，促進(jìn)糖脂代謝、細(xì)胞DNA損傷修復(fù)，參與動(dòng)脈粥樣硬化、心肌缺血、心肌肥厚等心血管疾病的病理生理過程。腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase，AMPK)是細(xì)胞能量開關(guān)，調(diào)節(jié)AMP/ATP比率，促進(jìn)線粒體生成、氧化代謝，參與肌細(xì)胞的能量調(diào)控。此外，AMPK可通過上調(diào)

4、細(xì)胞NAD+水平增強(qiáng)SIRT1活性。因而AMPK/SIRT1被認(rèn)為共同參與細(xì)胞能量代謝過程。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)及臨床研究證實(shí)，外源性雌激素可降低血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞MCP-1及RhoA基因與蛋白的表達(dá)，但其具體調(diào)節(jié)機(jī)制尚不明確。目前有研究證實(shí)外源性雌激素可調(diào)節(jié)AMPK/SIRT1通路，但其與下游信號分子（MCP-1和RhoA）的關(guān)系尚不明確。
　　目的:本實(shí)驗(yàn)通過去勢雌性SD大鼠建立絕經(jīng)模型，研究17β-雌激素灌胃給藥對去勢大鼠MCP-

5、1、RhoA、AMPK及SIRT1活性水平的影響，探討其改善血管內(nèi)皮及心肌代謝功能，發(fā)揮心血管保護(hù)作用的機(jī)制，為圍絕經(jīng)期及絕經(jīng)女性的雌激素補(bǔ)充治療提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)及理論依據(jù)。
　　方法:將40只3月齡雌性大鼠隨機(jī)分為空白對照組(CON，n=10)、去勢實(shí)驗(yàn)組(OVX+E2，n=10)、去勢對照組(OVX，n=10)和假手術(shù)組（SHAM，n=10）。去勢實(shí)驗(yàn)組給予100μg/kg/day17β-雌二醇灌胃給藥，其余三組給予等量生理鹽水灌

6、胃。灌胃16周后腹主動(dòng)脈采血，ELISA法測定血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、單核細(xì)胞趨化因子-1(MCP-1)及RhoA;處死大鼠后快速摘取心臟組織并稱重，通過HE染色光鏡下觀察通過心臟形態(tài)學(xué)變化;通過ELISA法檢測心臟組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SIRT1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)水平。免疫組織化學(xué)方法檢測心臟組織MCP-1及RhoA水平。
　　結(jié)果:灌胃16周后四組大鼠血清及心臟組織MCP-1、RhoA有顯著差異

7、(p＜0.05)。去勢實(shí)驗(yàn)組血清及心臟組織MCP-1、RhoA水平低于去勢對照組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。四組大鼠心臟組織勻漿SIRT1、AMhPK有顯著差異，去勢實(shí)驗(yàn)組心臟組織勻漿SIRT1、AMPK水平高于去勢對照組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　結(jié)論:17β-雌二醇可下調(diào)去勢雌性大鼠血清及心臟組織MCP-1、RhoA表達(dá)水平，從而發(fā)揮其心血管保護(hù)作用。其可能的機(jī)制是17β-雌二醇通過上調(diào)SIRT1/AMP