兔肝纖維化分期診斷的實驗研究：磁敏感加權(quán)成像和病理對照研究.pdf

1、第一部分肝纖維化動物模型的建立及其血清學(xué)改變
　　目的:采用皮下注射50％四氯化碳（CCl4）橄欖油溶液輔以高脂飼養(yǎng)的方法建立兔肝纖維化動物模型，研究其病理學(xué)和血清學(xué)變化，為影像學(xué)研究制作動物模型。
　　方法:健康新西蘭大白兔84只，雌雄各半，按性別各50%比例隨機分為實驗組（n=76）和對照組（n=8）。實驗組：背部皮下注射50%CCl4橄欖油溶液，每周1～2次，共12周，并給予高脂飼料飼養(yǎng)。對照組：背部皮下注射相同劑量的

2、生理鹽水，給予普通飼料喂養(yǎng)。在建模第2、4、6、8周周末分別選取實驗組兔10～12只、對照組兔2只進行實驗。實驗麻醉前經(jīng)兔耳緣靜脈抽血5～8ml，進行血清學(xué)檢查，檢查項目包括透明質(zhì)酸（HA）、Ⅲ型前膠原（PCⅢ）、Ⅳ型膠原（Ⅳ-c）、層黏連蛋白（LN）、總膽固醇（TC）、甘油三脂（TG）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）。實驗結(jié)束后取家兔肝臟行病理學(xué)檢查。按肝纖維化程度不同分為正常組、輕度肝纖維化組，中度肝纖維化組及重度肝纖維

3、化組，不同肝纖維化組的血清學(xué)指標的比較采用單因素方差分析，組間均數(shù)兩兩比較。各血清學(xué)指標與肝纖維化分組的關(guān)系采用Spearman相關(guān)性分析。P<0.05認為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　（1）造模過程中，76只實驗組兔中死亡23只，造模死亡率為30.26%，對照組兔8只均存活。實驗麻醉期間實驗組死亡8只，對照組死亡1只。納入研究共52只兔（實驗組45只，對照組7只），肝纖維化病理分期結(jié)果如下：對照組：S0期7例，實驗

4、組：S1期2例、S2期7例、S3期14例和S4期22例。
　?。?）血清學(xué)指標 HA、IV-c、LN、PCⅢ、TC、TG、AST均隨著肝纖維化程度加重而升高，以HA最密切(r=0.528)；不同肝纖維化組間HA、IV-c、TG、ALT差異有統(tǒng)計學(xué)意義；LN、PCⅢ、TC、AST無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)論:采用CCl4皮下注射輔以高脂飼養(yǎng)能夠成功獲得肝纖維化的動物模型，血清學(xué)指標均隨著肝纖維化程度加重而升高。
　　第二部分

5、磁敏感加權(quán)成像評價兔肝纖維化的實驗研究
　　目的:探討磁共振磁敏感加權(quán)成像（SWI）評估家兔肝纖維化分期的可行性。
　　方法:對第一部分造模成功的45只肝纖維化兔和7只正常家兔采取外周靜脈血，進行磁共振檢查，檢查結(jié)束后取兔肝臟制作病理大切片。3名研究者共同分析SWI圖像，觀察影像表現(xiàn)，取家兔肝臟右后葉中間層面進行圖像分析與測量，測量肝臟信號（SIL）和同層豎脊肌信號（SIM），計算肝臟與豎脊肌信號強度比RL/M（RL/M=S

6、IL/SIM）。以病理學(xué)檢查結(jié)果為金標準進行對照研究。將不同肝纖維化組的 SIL、RL/M進行單因素方差分析，組間均數(shù)兩兩比較，并應(yīng)用 Spearman分析對SIL、RL/M、血清學(xué)指標與肝纖維化分組進行相關(guān)分析。各項血清學(xué)指標、家兔性別對SIL、RL/M的影響作用采用多元線性回歸分析。利用受試者工作特征曲線（ROC）評價SWI對肝纖維化的診斷效能。P<0.05認為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　?。?）隨著兔肝纖維化程

7、度的加重，RL/M、SIL值呈下降趨勢，各期RL/M、SIL值差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，兩者均與肝纖維化的嚴重程度呈負相關(guān)。正常肝臟與中、重度肝纖維化，輕度與重度肝纖維化,中度與重度肝纖維化之間RL/M值比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。正常肝臟與中、重肝纖維化之間SIL值差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　（2）血清學(xué)指標TC、TG、ALT、AST與SIL值之間存在負相關(guān)，以TG最密切；IV-c、PCⅢ、TC、TG、ALT、AST與RL/M值之間存在負相關(guān)