何首烏的品質(zhì)評價研究.pdf

1、何首烏（Polygonum multiflorum Thunb.）為我國傳統(tǒng)的中草藥之一，生首烏系蓼科植物何首烏的干燥塊根，具有解毒、消癰、截瘧、潤腸通便之功效;制首烏是何首烏的炮制品，具有補(bǔ)肝腎、益精血、烏須發(fā)、強(qiáng)筋骨之功效;首烏藤為何首烏的干燥藤莖，具有養(yǎng)血安神、祛風(fēng)通絡(luò)之功效。然而，產(chǎn)地、采收、加工、炮制等因素對何首烏藥材的有效成分造成一定的影響，導(dǎo)致藥材質(zhì)量參差不齊。如何在藥材生產(chǎn)過程中，保證何首烏藥材的優(yōu)質(zhì)和質(zhì)量均一已成為其生

2、產(chǎn)過程中的關(guān)鍵問題。本課題采用現(xiàn)代分析技術(shù)，對何首烏藥材中多元指標(biāo)成分進(jìn)行系統(tǒng)分析，比較不同產(chǎn)地、炮制前后和同基源不同入藥部位藥材中指標(biāo)成分的差異，并考察不同采收時間、加工方法藥材中指標(biāo)成分的變化;采用UPLC-TripleTOF-MS/MS技術(shù)對何首烏進(jìn)行植物代謝組學(xué)研究，分析不同采收時間、不同產(chǎn)地、加工方法、炮制前后和同基源不同入藥部位藥材的化學(xué)成分，篩選和鑒定差異化學(xué)成分;建立何首烏HPLC和脂溶性成分GC-MS指紋圖譜。從而為探

3、索何首烏藥材品質(zhì)形成過程、選擇適宜產(chǎn)區(qū)及適時采收和合理加工提供基礎(chǔ)資料和科學(xué)依據(jù)。
　　課題研究內(nèi)容主要包括以下幾個方面:
　　1、文獻(xiàn)研究系統(tǒng)查閱何首烏國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，對其進(jìn)行文獻(xiàn)綜述研究。
　　2、何首烏多元指標(biāo)成分的分析研究采用現(xiàn)代分析技術(shù)分析比較不同產(chǎn)地、炮制前后和同基源不同入藥部位藥材中指標(biāo)成分的差異及不同采收時間、加工方法藥材中指標(biāo)成分的變化，并采用主成分分析與Topsis等對何首烏中指標(biāo)成分進(jìn)行綜合評價。

4、建立UPLC-TQ/MS同時測定何首烏中二苯乙烯（二苯乙烯苷、虎杖苷和白藜蘆醇）、蒽醌（大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酸和大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷）、黃酮（表兒茶素、蘆丁、金絲桃苷、紫云英苷和槲皮素）及酚酸（沒食子酸）4類成分含量的方法;建立MEKC-DAD同時測定何首烏中二苯乙烯苷、蒽醌（大黃素、蘆薈大黃素、大黃酚、大黃酸和大黃素甲醚）和兒茶素含量的方法;建立QTRAP LC-MS/MS同時測定何首烏中10種核苷類成分（

5、尿嘧啶、胞苷、鳥嘌呤、2'-脫氧胞苷、尿苷、腺嘌呤、肌苷、鳥苷、胸苷和腺苷）含量的方法;采用UV-VIS測定何首烏中總多糖、總磷脂和總鞣質(zhì)的含量;采用ICP-MS測定何首烏中24種無機(jī)元素;采用GC-MS分析何首烏和首烏藤中揮發(fā)性成分;采用衍生化GC-MS分析何首烏中脂肪酸組成及相對含量。結(jié)果顯示:不同采收時間、不同加工何首烏中指標(biāo)成分呈現(xiàn)動態(tài)變化;不同產(chǎn)地及商品藥材、炮制前后和同基源不同入藥部位藥材中指標(biāo)成分具有一定差異。
　　

6、3、何首烏UPLC-Triple TOF-MS/MS植物代謝組學(xué)研究基于UPLC-TripleTOF-MS/MS技術(shù)結(jié)合多元統(tǒng)計分析，對不同采收時間、產(chǎn)地、加工方法、炮制前后及同基源不同入藥部位何首烏中化學(xué)成分進(jìn)行分析，篩選和鑒定差異化學(xué)成分，并探討其變化規(guī)律。結(jié)果顯示:不同采收時間何首烏中篩選出9個共有差異成分，且呈現(xiàn)出動態(tài)變化的趨勢;不同產(chǎn)地何首烏中化學(xué)成分組成差異顯著，篩選出12個共有差異成分;不同加工方法何首烏中篩選出15個共有

7、差異成分，且呈現(xiàn)動態(tài)變化;炮制前后何首烏中化學(xué)成分差異顯著，生首烏中檢測到兒茶素葡萄糖苷、二苯乙烯-葡萄苷酸、Emdin-O-glucoside sulfate和番瀉苷元A，而制首烏中未檢測到上述成分，但檢測到5-羥甲基糠醛，同時炮制前后樣品中還篩選出14個共有的差異化學(xué)成分;同基源不同入藥部位何首烏中檢測到奎尼酸、蓮花掌苷、沒食子酸、3，8-dihydroxy-1-methoxyxanthone、土大黃苷、白藜蘆醇-4'-O-β-D-

8、吡喃葡萄糖苷、ω-羥基大黃素、大黃酸、3，6-二甲氧基-2，5，7，8-四羥基萘醌、大黃素甲醚，而首烏藤中檢測到紫膠酸-D-8-O-（6'-O-桂皮酰）-吡喃葡萄糖苷、原始車菊素B-7-3-O沒食子酰、兒茶素三聚體、Aloesone-7-O-β-D-glucopyranoside、3，4'，5-trihydroxystlbene-4'-O-β-D-(6"-O-galloyl)-glucopyranoside、吡喃葡萄糖基三羥基甲基蒽酮、

9、大黃素甲醚-8-O-β-D-龍膽二糖苷，此外同基源何首烏和首烏藤中還篩選出12個共有的差異化學(xué)成分。
　　4、何首烏的指紋圖譜研究研究建立不同產(chǎn)地何首烏HPLC指紋圖譜及脂肪酸衍生化GC-MS指紋圖譜，并做模糊聚類分析和相似度評價。初步建立了以19個共有峰為特征指紋信息的何首烏HPLC指紋圖譜以及9個共有峰為特征指紋信息的何首烏脂肪酸的指紋圖譜。方法準(zhǔn)確可靠，重現(xiàn)性好，達(dá)到中藥指紋圖譜的技術(shù)要求，可用于何首烏藥材內(nèi)在質(zhì)量的評價和控