皮質(zhì)脊髓投射神經(jīng)元的在體分離與基因表達分析.pdf

1、目的:哺乳動物的大腦皮層接受、整合來自身體各處的感覺信息,并依靠第五皮層的下行性投射神經(jīng)元將控制信息傳遞出去。來自不同區(qū)域的第五皮層投射神經(jīng)元其下行性投射靶區(qū)是不同的。視覺區(qū)的下行性投射神經(jīng)元投射到上丘,運動區(qū)則投射到脊髓。上述的這種現(xiàn)象是由于出生后軸突的選擇性修剪引起的。本研究是為了尋找皮質(zhì)脊髓投射神經(jīng)元(CSPN)發(fā)育的關(guān)鍵基因,嘗試建立一種在體分離投射神經(jīng)元和基因表達分析的方法。
　　 方法:我們在P8小鼠椎體交叉處注射逆

2、行標記物,用來標記第五皮層的下行性投射神經(jīng)元。同時用顯微捕獲激光切割的方法對視覺區(qū)和運動區(qū)的投射神經(jīng)元進行分離。分別提取RNA,通過線性放大后,對其進行質(zhì)量控制。對于質(zhì)量合格的RNA,送去上海做基因芯片實驗,通過對CSPN表達譜以及皮層組織表達譜的對比分析,尋找特異性表達在CSPN的基因。
　　 結(jié)果:我們發(fā)現(xiàn)有很多個基因在純化的CSPN上富表達。如遺傳痙攣性截癱病變基因Spg3a與印記基因Meg8。對于這一結(jié)果我們也通過RT-