基于“脾主肌肉”探討葛根復(fù)方對(duì)EAMG大鼠骨骼肌肌力及神經(jīng)傳導(dǎo)功能的影響.pdf

1、目的：基于“脾主肌肉”探討葛根及其配伍對(duì)EAMG大鼠骨骼肌肌力及神經(jīng)傳導(dǎo)功能的影響，探討EAMG大鼠模型制造的有效方法，分析葛根及其配伍對(duì)治療MG的作用機(jī)制。
　　方法：選擇健康的SPF Lewis雌性大鼠150只，分空白組（10只），模型組（20只），強(qiáng)的松組（20只），葛根組（20只），葛參組（20只），葛芪組（20只），葛妙組（20）只，葛芪參妙組（20只）。首次免疫稱鼠源性AchR-a亞基97-116肽段100 ug溶于高

2、壓滅菌的100uL3％氨水中，再混入CFA和PBS，將R97-116、CFA、PBS三者按1:1.5:1.5的比例充分混勻后，取乳劑200uL（(含R97-116:100ug）給造模各組大鼠多點(diǎn)皮下注射接種免疫。30 d后進(jìn)行二次免疫，稱取肽段50ug溶于高壓滅菌的50uL3％氨水中，再混入IFA和PBS，將R97-116、IFA、PBS三者按1:3:3的比例充分混勻,取乳劑200 uL(含R97-116:50ug)強(qiáng)化接種，空白組大鼠

3、注射等量PBS，正常飼養(yǎng)，觀察大鼠的體重和肌力變化狀況。確立建立EAMG模型后，進(jìn)行灌胃治療：空白組、模型組每天給予等體積的生理鹽水，強(qiáng)的松組給予為5.4 mg/kg/d強(qiáng)的松懸液灌胃；葛根組給予2.08 g/kg/d葛根中藥液灌胃；葛芪組給予3.65g/kg/d葛根、黃芪中藥液灌胃；葛參組給予3.65 g/kg/d葛根、丹參灌胃；葛妙組給予8.33 g/kg/d葛根、四妙散灌胃；葛芪參妙組給予11.46 g/kg/d葛根、黃芪、丹參、

4、四妙散中藥液灌胃。大鼠灌胃給藥體積為l0 mL/kg，灌胃治療時(shí)間為4周。觀察各組大鼠體重和精神狀態(tài)的變化、大鼠肌力評(píng)分、大鼠游泳時(shí)間、大鼠AchR-Ab的表達(dá)、大鼠RNS生理肌電的變化、大鼠相關(guān)肌肉因子NGF和LN-2的表達(dá)變化情況。
　　結(jié)果:①造模成功后，與空白組比較，模型組大鼠體重明顯減輕，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；第10 w治療結(jié)束后，與模型組大鼠比較，各治療組大鼠體重均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與

5、強(qiáng)的松組比較，葛根組、葛芪組、葛參組、葛妙組大鼠體重均低于強(qiáng)的松組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；葛芪參妙組的大鼠的體重增長值逐漸超過強(qiáng)的松組，但和強(qiáng)的松組區(qū)別不明顯，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；②造模成功后，模型組大鼠的肌力評(píng)分明顯高于空白組，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;治療后各治療組大鼠的肌力評(píng)分明顯低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；治療后葛根組、葛芪組、葛參組及葛妙組肌力評(píng)分明顯高于強(qiáng)的松組，差異有

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；治療后葛芪參妙組大鼠肌力評(píng)分明顯低于強(qiáng)的松組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；③造模成功后，與空白組大鼠比較，模型組大鼠的游泳時(shí)間明顯短于空白組大鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；治療后，各治療組的游泳時(shí)間都明顯長于模型組大鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與強(qiáng)的松組比較，葛根組、葛芪組、葛參組及葛妙組的游泳時(shí)間均短于強(qiáng)的松組，葛芪參妙組大鼠游泳時(shí)間長于強(qiáng)的松組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；

7、④造模成功后，各造模組大鼠血清 AchR-Ab表達(dá)水平明顯高于空白組大鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；治療后各治療組大鼠 AchR-Ab水平明顯低于模型組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；治療后葛根組、葛芪組、葛參組大鼠 AchR-Ab表達(dá)水明顯高于強(qiáng)的松組、葛妙組、葛芪參妙組大鼠AchR-Ab表達(dá)水明顯低于強(qiáng)的松組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；⑤造模成功后，模型組大鼠的肌電波幅頻率明顯低于空白組大鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

8、（P<0.05）；治療后各治療組大鼠的肌電波幅頻率明顯高于模型組大鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；治療后葛根組、葛芪組、葛參組、葛妙組大鼠肌電圖波頻率幅明顯低于強(qiáng)的松組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；葛芪參妙組的肌電圖頻率波幅明顯高于強(qiáng)的松組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；⑥造模成功后，與空白組比較，模型組大鼠骨骼肌中NGF陽性表達(dá)值明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；治療后與模型組大鼠比較，各治療組大鼠的NGF陽

9、性表達(dá)值都有升高，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與強(qiáng)的松組比較，葛根組、葛參組、葛芪組與、葛妙組中陽性表達(dá)率明顯低于強(qiáng)的松組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或 P＜0.01），葛芪參妙組大鼠的NGF陽性表達(dá)率和強(qiáng)的松組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。⑦造模成功后，與空白組比較，模型組大鼠骨骼肌中LN-2陽性表達(dá)值明顯降低，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；治療后與模型組比較，各治療組大鼠骨骼肌中LN-2陽性表達(dá)值都有明顯的

10、升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與強(qiáng)的松組比較，葛根組、葛參、葛妙組值明顯較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；葛芪組、與葛芪參妙組大鼠的LN-2陽性表達(dá)率和強(qiáng)的松組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　?、俑鸶捌鋸?fù)方對(duì)MG大鼠骨骼肌肌力及神經(jīng)傳導(dǎo)功能恢復(fù)均有一定效果，葛芪參妙組對(duì)MG大鼠的肌力恢復(fù)效果較好。
　　②血清AchR-Ab含量、骨骼肌中NGF、LN-2表達(dá)水平和 MG發(fā)病表現(xiàn)出密切相