雙重阻斷腎素-血管緊張素系統(tǒng)對實驗性糖尿病腎病大鼠腎組織中Sonic hedgehog信號通路激活的影響.pdf

1、目的：觀察雙重阻斷腎素-血管緊張素系統(tǒng)（renin-angiotensin system， RASS）對實驗性糖尿病腎病大鼠腎組織中Sonic hedgehog（Shh）信號通路家族Shh、Ptch1蛋白及VEGF蛋白表達(dá)的影響，探討Shh信號通路在糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制中調(diào)控作用。
　　方法：采用建模成功后的標(biāo)本進(jìn)行實驗，將雄性SD大鼠通過高脂高糖飲食加小劑量鏈霉素誘導(dǎo)糖尿病腎病模型，分為正常對照組（A組）、糖尿病腎病組（B組）、貝

2、那普利治療組（C組）、厄貝沙坦治療組（D組）、聯(lián)合治療組（E組）。C組給予貝那普利10mg·kg-1·d-1灌胃，D組給予厄貝沙坦30mg· kg-1·d-1灌胃，E組給予貝那普利10mg·kg-1·d-1聯(lián)合厄貝沙坦30mg·kg-1·d-1灌胃。8周后處死實驗動物并對腎臟組織進(jìn)行石蠟包埋。應(yīng)用Shh兔單克隆抗體、Ptch1兔多克隆抗體、VEGF鼠抗兔單克隆抗體采用免疫組織化學(xué)法（SP）檢測五組腎組織中Shh、Ptch1、VEGF蛋白

3、的表達(dá)。應(yīng)用Image Pro Plus6.0（IPP）圖像分析軟件對各組免疫組化切片進(jìn)行分析。實驗采用 SPSS18.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行綜合處理。計量資料均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x±s）表示，多組間相同指標(biāo)比較采用單因素方差（ANOVA）分析，以P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：免疫組化結(jié)果顯示：Shh、Ptch1蛋白主要表達(dá)在腎小管上皮細(xì)胞胞膜；VEGF蛋白表達(dá)于腎小球內(nèi)皮細(xì)胞和腎小管上皮細(xì)胞包膜和胞質(zhì)。1. A、C、D和

4、E組腎組織表達(dá)Shh、Ptch1蛋白水平顯著高于B組(P<0.05)；C、D、E組腎組織中Shh、Ptch1蛋白表達(dá)水平均高于A組(P<0.05)；E組表達(dá)水平顯著高于C和D組(P<0.05)；C組和D組表達(dá)未見明顯差異（P>0.05）。2. B組腎臟組織表達(dá)VEGF蛋白水平顯著高于A組(P<0.01)；C、D、E組腎組織中VEGF蛋白表達(dá)水平均低于B組(P<0.05)；E組表達(dá)顯著低于C組和D組(P<0.05),但其表達(dá)量仍高于A組(

5、P<0.05)；C組和D組表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：貝那普利（ACEI）和厄貝沙坦（ARB）類藥物能夠顯著降低糖尿病腎病腎組織中 VEGF蛋白的表達(dá)。正常腎臟組織中存在Shh信號通路成員Shh、Ptch1蛋白表達(dá)的現(xiàn)象并且高于糖尿病腎病組，貝那普利和厄貝沙坦藥物干預(yù)可通過阻斷腎素-血管緊張素系統(tǒng)上調(diào)腎臟組織中Shh信號通路家族中Shh和Ptch1蛋白的表達(dá)。通過Shh信號通路表達(dá)上調(diào)來產(chǎn)生對糖尿病腎病的治療