p21及p27基因表達(dá)與肝細(xì)胞肝癌關(guān)系的病例對(duì)照研究.pdf

1、目的：探討抑癌基因p21及p27在原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌（Hepatocellular carcinoma(HCC)）患者及健康人群全血中的表達(dá)水平及兩者之間的關(guān)系，探索全血中p21和p27基因的表達(dá)水平與HCC患者臨床病例資料之間的關(guān)系，為肝癌高危人群的篩查以及對(duì)其進(jìn)行一、二級(jí)預(yù)防提供依據(jù)。
　　方法：本研究以HCC患者作為病例組，就診于醫(yī)院體檢中心體檢的健康人群作為對(duì)照組，采集患者及對(duì)照組的年齡、性別等一般信息，患者的肝炎病史、飲酒

2、史、吸煙史、飲食習(xí)慣、受教育程度、職業(yè)等信息。采集患者腫瘤的詳細(xì)資料，包括：腫瘤大小、數(shù)目、是否有門靜脈癌栓、是否有肝硬化、是否合并門靜脈高壓等。以研究對(duì)象的外周全血作為標(biāo)本，提取全血中的總RNA,對(duì)RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄形成第一鏈cDNA,以cDNA作為模板，以GAPDH為內(nèi)參對(duì)照進(jìn)行PCR擴(kuò)增,應(yīng)用qPCR（Quantitative Realtime-PCR）的方法對(duì)PCR進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè),了解樣本中p21基因和p27基因的相對(duì)表達(dá)量，并

3、對(duì)兩者的相關(guān)性進(jìn)行分析，同時(shí)分別對(duì)比這兩種基因的相對(duì)表達(dá)量與肝癌患者臨床病例資料的相關(guān)性。采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，經(jīng)正態(tài)性和方差齊性檢驗(yàn)后數(shù)據(jù)均符合正態(tài)分布且方差相等，故采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。p21基因和p27基因的相對(duì)表達(dá)量相關(guān)性采用Pearson相關(guān)性分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：p21mRNA在HCC患者外周全血細(xì)胞中相對(duì)表達(dá)量為0.2

4、7±0.03,健康人群的外周血白細(xì)胞中相對(duì)表達(dá)量為0.05±0.029,p21基因在病例組的相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。通過(guò)對(duì)病例組臨床資料和p21基因相對(duì)表達(dá)量比較可知，飲酒，HBV感染，術(shù)前AFP值與p21基因相對(duì)表達(dá)量相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），p21基因相對(duì)表達(dá)量與年齡、性別、吸煙、門脈高壓、腫瘤個(gè)數(shù)、腫瘤大小、有無(wú)包膜、肝硬化、合并門靜脈癌栓均無(wú)關(guān)（p＞0.05）。p27mRNA在HCC

5、患者外周全血細(xì)胞中相對(duì)表達(dá)量為0.69±0.059,在非腫瘤病人的外周全血細(xì)胞中相對(duì)表達(dá)量為0.07±0.0048,p27基因在HCC組的相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；p27基因相對(duì)表達(dá)量與病例組臨床資料比較可知，p27基因相對(duì)表達(dá)量與年齡、性別、飲酒、吸煙、HBV感染，術(shù)前AFP值、門脈高壓、腫瘤個(gè)數(shù)、腫瘤大小、有無(wú)包膜、肝硬化、合并門靜脈癌栓均無(wú)關(guān)（p>0.05）。病例組和對(duì)照組中p21基因和p27基因的m

6、RNA相對(duì)表達(dá)量相關(guān)關(guān)系顯示，病例組（r=-0.44）呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，對(duì)照組（r=0.197）呈正相關(guān)關(guān)系，但相關(guān)系數(shù)均接近0，故兩基因相關(guān)關(guān)系不大，有待于增加樣本量做重復(fù)實(shí)驗(yàn)證實(shí)。
　　結(jié)論：（1）p21基因和p27基因在原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者外周全血中表達(dá)水平升高，提示p21基因和p27基因的表達(dá)水平可能與原發(fā)性肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)，檢測(cè)其全血中表達(dá)水平有望成為肝癌發(fā)病的早期預(yù)測(cè)指標(biāo)。（2）飲酒，乙肝病史，術(shù)前AFP水平能夠使p21