基于中藥組效關(guān)系的姜黃甘草組合物抗腫瘤活性成分的辨識(shí)研究.pdf

1、姜黃和甘草是兩種傳統(tǒng)的藥用植物，現(xiàn)代研究表明，它們均具有多種藥理活性。本論文以姜黃甘草組合物為研究對(duì)象，采用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法建立了組合物主要成分與其抗腫瘤活性之間的組效關(guān)系模型，用于辨識(shí)其生物活性成分，為開(kāi)發(fā)以姜黃甘草活性成分為主的新藥奠定基礎(chǔ)。
　　1.建立了姜黃藥材HPLC-UV指紋圖譜分析方法，并依此分析了50批次姜黃提取物指紋圖譜，標(biāo)定出15個(gè)共有特征峰，以異槲皮苷為內(nèi)標(biāo)物，采用內(nèi)標(biāo)法對(duì)此15個(gè)特征峰進(jìn)行相對(duì)定量分析，不同特

2、征化合物的含量存在很大差異。采用UPLC-MS/MS技術(shù)對(duì)其指紋圖譜中各色譜峰進(jìn)行定性分析，在文獻(xiàn)基礎(chǔ)上，根據(jù)一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜碎片信息，推測(cè)出15個(gè)共有峰中的12個(gè)色譜峰成分，其中包括姜黃素類(lèi)化合物和揮發(fā)油類(lèi)成分。
　　2.建立了甘草藥材HPLC-UV指紋圖譜分析方法，并依此分析了50批次甘草提取物指紋圖譜，標(biāo)定出31個(gè)共有特征峰，以異槲皮苷為內(nèi)標(biāo)物，采用內(nèi)標(biāo)法對(duì)此31個(gè)特征峰進(jìn)行相對(duì)定量分析，不同特征峰的含量存在很大差異。采用UP

3、LC-MS/MS技術(shù)對(duì)指紋圖譜中各色譜峰進(jìn)行定性分析，推測(cè)出31個(gè)共有峰中的29個(gè)色譜峰成分，其中包括三萜皂苷類(lèi)、黃酮類(lèi)、異黃酮類(lèi)和香豆素類(lèi)。
　　3.采用MTT法測(cè)定了50批次姜黃甘草組合物對(duì)人宮頸癌HeLa細(xì)胞的抑制活性，以抑制率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，抑制率范圍為0.044-0.918，結(jié)果表明不同批次的姜黃甘草組合物抗腫瘤活性存在顯著差異。
　　4.以50批次姜黃甘草組合物的46個(gè)特征峰相對(duì)峰面積為自變量，其對(duì)HeLa細(xì)胞的抑制

4、率為因變量，采用粒子群優(yōu)化算法（PSO）優(yōu)化支持向量回歸機(jī)（SVR）模型參數(shù)，最佳參數(shù)如下：best C=10.4771，best g=0.1469，bestε=0.001，最優(yōu)模型的均方誤差MSE為0.0083，相關(guān)系數(shù)R為0.9321。
　　5.采用最佳 SVR模型結(jié)合平均影響值（MIV）對(duì)姜黃甘草組合物活性成分進(jìn)行辨識(shí)，依據(jù)MIV絕對(duì)值大小對(duì)各自變量排序，選取絕對(duì)MIV值大于0.003的前15個(gè)特征峰（8個(gè)來(lái)源于姜黃）所對(duì)應(yīng)