苗藥組方對COPD大鼠氣道及肺組織c-myc表達的影響.pdf

1、研究目的:通過觀察慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠氣道重塑模型及正常大鼠氣道及肺組織原癌(C-myc)基因mRNA、蛋白表達的變化，來探討C-myc基因與氣道重塑的關系;并用苗藥組方對COPD大鼠氣道重塑進行干預，為臨床上治療慢阻肺提供新的治療方向。
　　研究方法:
　　1.80只雄性SD大鼠隨機分為正常對照組(20只)、模型組(60只)。模型組大鼠:COPD造模參考宋一平造模方法，采用熏香煙聯(lián)合氣道內滴注脂多糖(LPS)法

2、構建，分別于第1天、第14天經氣管注入LPS200ug/ul，第2-13天、第15-28天煙熏0.5h，共28d。COPD模型組經造模成功后，再隨機再分為COPD模型組(20只)、苗藥組方干預組(20只)、地塞米松治療組(20只)，苗藥組方干預組大鼠于造模成功后給予苗藥組方煎劑灌胃治療，每天2次，每次2ml，地塞米松治療組大鼠腹腔注射地塞米松，1mg/kg/天，療程為30天，上述大鼠分別在造模后各處死6只，處死大鼠后，收集標本，取大鼠氣

3、道及肺組織組織進行HE染色，并觀察其余各組大鼠的一般狀態(tài)。
　　2.分別運用實時熒光定量法(real-time PCR)進行正常對照組、COPD模型組、苗藥組方干預組、地塞米松治療組大鼠氣道成纖維細胞C-myc mRNA含量測定。
　　3.用免疫組化法檢測正常對照組、COPD模型組、苗藥組方干預組、地塞米松治療組大鼠氣道及肺組織中原癌蛋白的表達情況。
　　4.用ELISA法檢測正常對照組、COPD模型組、苗藥組方干預組

4、、地塞米松治療組大鼠氣道成纖維細胞上清液中TGF-β1與PDGF的濃度。
　　結果:
　　1.COPD模型組大鼠開始出現(xiàn)氣道壁及平滑肌增厚，氣道上皮受損，部分纖毛脫落，氣道周圍及肺泡間隔內有大量炎癥細胞浸潤，大鼠支氣管管腔相對變窄，部分肺泡破壞、融合，肺泡腔擴大;苗藥組方干預組及地塞米松治療組與COPD模型組相比，氣道管腔狹窄程度和肺泡結構破壞程度有減輕。
　　2.實時熒光定量PCR(real-time PCR)結果顯

5、示:與正常對照組相比較，COPD模型組大鼠氣道成纖維細胞C-Myc基因mRNA較正常對照組有顯著的增加，具有統(tǒng)計學意義，與COPD模型組相比，苗藥組方干預組及地塞米松治療組大鼠氣道成纖維細胞原癌基因mRNA的表達量明顯降低。免疫組化結果顯示:COPD模型組大鼠氣道及肺組織C-Myc蛋白較正常對照組有顯著地增加。與COPD模型組相比，苗藥組方干預組及地塞米松治療組大鼠氣道及肺組織原癌蛋白的陽性表達率明顯降低。
　　3.酶聯(lián)免疫(EL

6、ISA)結果顯示:與正常對照組相比較，COPD模型組大鼠氣道成纖維細胞上清液中轉化生長因子(TGF-β1)及血小板衍生因子(PDGF)的濃度顯著高于正常對照組，苗藥組方干預組及地塞米松治療組大鼠氣道成纖維細胞上清液中TGF-β1及PDGF的濃度顯著低于COPD模型組，其中苗藥組方干預組與地塞米松治療組大鼠氣道成纖維細胞上清液中TGF-β1及PDGF的濃度相比較，沒有統(tǒng)計學差異。
　　結論:
　　1.COPD大鼠氣道重塑這一病