精神疾病及腦卒中的關(guān)聯(lián)分析和Chd7基因誘變小鼠發(fā)病機(jī)制初探.pdf

1、精神分裂癥、重度抑郁癥是兩種最常見(jiàn)的精神疾病，不僅給患者及家屬還給整個(gè)社會(huì)的醫(yī)療保健工作造成了很大的精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。精神分裂癥和重度抑郁癥的發(fā)病率分別為1％和5%-25%，遺傳度分別為80%和37%。迄今為止，這兩種精神疾病的發(fā)病機(jī)制依舊不明，且有越來(lái)越多的研究證明了精神分裂癥、重度抑郁癥以及雙相情感障礙癥之間共享部分易感因素。腦卒中是另外一種嚴(yán)重的常見(jiàn)疾病（也稱(chēng)復(fù)雜疾?。?，具有極高的死亡率和致殘率。家系研究及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等研究表明遺傳因素

2、在腦卒中的發(fā)生中發(fā)揮重要作用，但其發(fā)病機(jī)制尚闡明。本論文一部分工作是采用病例對(duì)照的方法在中國(guó)漢族人群中進(jìn)行精神分裂癥、重度抑郁癥和中風(fēng)這三種常見(jiàn)疾病的易感基因關(guān)聯(lián)研究，并探討精神分裂癥和重度抑郁癥的共享易感因素以及基因-基因互作與這兩種疾病的關(guān)系。另外一部分工作是對(duì)一種 Chd7基因誘變小鼠進(jìn)行表型鑒定，并通過(guò)基因表達(dá)譜的研究來(lái)初步探索該誘變鼠的致病機(jī)制并進(jìn)一步研究Chd7基因的功能。
　　谷氨酸傳遞異常是精神疾病發(fā)生的重要假說(shuō)之

3、一。代謝型谷氨酸受體亞型7（GRM7）和亞型8（GRM8）參與了谷氨酸的傳遞過(guò)程，以前也有研究報(bào)道了二者在精神分裂癥和重度抑郁癥的發(fā)病過(guò)程具有重要作用。我們選擇了GRM7和GRM8基因上共14個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)（SNP）在由1235例精神分裂癥患者、1045例重度抑郁癥患者和1235例健康對(duì)照組成的中國(guó)漢族人群樣本中進(jìn)行了關(guān)聯(lián)分析。經(jīng)過(guò)permutation矯正之后，我們發(fā)現(xiàn) GRM7基因上的位點(diǎn) rs2229902（permutat

4、ed Pallele=0.0005，OR=1.492）和rs9870680（permutated Pallele=0.0023，OR=1.262）以及GRM8基因上的位點(diǎn)rs2237781（permutated Pallele=0.0027，OR=1.346）與精神分裂癥顯著關(guān)聯(lián)；GRM7基因上的位點(diǎn)rs779706及GRM8基因上的位點(diǎn)rs1361995與重度抑郁癥顯著關(guān)聯(lián)?；?基因互作分析發(fā)現(xiàn)由 GRM7和 GRM8基因組成的一個(gè)

5、三位點(diǎn)模型與重度抑郁癥的發(fā)生顯著相關(guān)。而且，Meta分析和單倍型分析進(jìn)一步證實(shí)了結(jié)果的顯著性。我們發(fā)現(xiàn)了GRM7和GRM8基因是中國(guó)漢族人群中精神分裂癥和重度抑郁癥的共享易感基因，而且這兩個(gè)基因之間的潛在相互作用也是精神疾病的風(fēng)險(xiǎn)因素。
　　中鏈?；o酶A合成酶家族成員1（Acyl-CoA synthetase medium-chain family member1，ACSM1）有催化中鏈脂肪酸與輔酶A鏈接的活性，主要功能是降解中

6、鏈脂肪酸來(lái)供能。以前有研究報(bào)道ACSM1基因的遺傳多態(tài)性是高甘油三酯血癥的風(fēng)險(xiǎn)因子；精神分裂癥患者有高水平的代謝綜合癥及心血管風(fēng)險(xiǎn)因素。而且，在歐洲人群中首次發(fā)現(xiàn)了ACSM1基因是精神分裂癥的易感基因，但這項(xiàng)結(jié)果沒(méi)有在其他人群中進(jìn)行驗(yàn)證。因此在第二部分研究中，利用與第一部分相同的樣本，我們不僅首次驗(yàn)證了ACSM1在中國(guó)漢族人中與SCZ的關(guān)聯(lián)結(jié)果，同時(shí)還檢測(cè)了其與MDD的關(guān)系。對(duì)ACSM1基因上的6個(gè)SNP進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析之后，我們發(fā)現(xiàn)位點(diǎn)

7、rs163234不僅與精神分裂癥（permutated Pallele=0.0017，OR=1.350）還與 MDD顯著關(guān)聯(lián)（permutated Pallele=0.0048，OR=1.329）；位點(diǎn)rs433598表現(xiàn)出于SCZ的顯著相關(guān)性（permutated Pallele=0.0043，OR=1.303）。包含這兩個(gè)位點(diǎn)的單倍型分析也表現(xiàn)出了陽(yáng)性結(jié)果。因此，我們的研究證實(shí)了ACSM1基因是中國(guó)漢族人群中精神分裂癥和重度抑郁癥的

8、易感基因。
　　論文的第三部分集中探討了中國(guó)漢族人群中對(duì)氧磷酶基因家族（paraoxonase，PON）的PON1、PON2和PON3基因與腦卒中的關(guān)系。PON基因家族是心血管疾病的潛在風(fēng)險(xiǎn)因子，還能抑制低密度脂蛋白的氧化并降低動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。有研究報(bào)道了PON基因家族與腦卒中顯著相關(guān)，但不同人群中得到的結(jié)果并不一致。本研究樣本中508例健康對(duì)照和498例患者，包括328例缺血性腦卒中以及170例失血性腦卒中。我們從3個(gè)基因中

9、共選取了11個(gè)SNP進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)在顯性模型分析中，對(duì)混雜因素進(jìn)行校正后，PON1基因啟動(dòng)子區(qū)的位點(diǎn) rs705381(-162)與整體中風(fēng)以及缺血性腦卒中顯著關(guān)聯(lián)，但并不與失血性腦卒中關(guān)聯(lián)；同時(shí)還發(fā)現(xiàn)位點(diǎn) rs854571(-824)與中風(fēng)存在微弱的關(guān)聯(lián)。這些發(fā)現(xiàn)說(shuō)明PON1基因可能是中國(guó)漢族人群中腦卒中的易感因素。
　　論文的第四部分內(nèi)容主要是初步探索我們實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的Chd7基因誘變鼠的發(fā)病機(jī)制。我們對(duì) Ch d7基因誘變鼠的

10、表型進(jìn)行了全方位鑒定，并對(duì)Chd7＋＋、Chd7＋－和Chd7－－三種基因型的胚胎期E10.5的小鼠進(jìn)行了表達(dá)譜芯片實(shí)驗(yàn)。胚胎期10.5是小鼠發(fā)育的中期，也是純合子死亡的時(shí)期。我們發(fā)現(xiàn)了 Chd7基因誘變鼠表現(xiàn)出了一系列類(lèi)CHARGE綜合征癥狀的表型，例如打轉(zhuǎn)、生長(zhǎng)發(fā)育緩慢、眼組織缺損、下巴短且低、舌頭突出的表型，胚胎水腫及耳廓不清等。表達(dá)譜分析結(jié)果提示了一系列可能與小鼠疾病表型密切相關(guān)的基因，例如 Epha3基因、Trpm3基因、Al