GC-MS技術(shù)對兒童紫癜性腎炎熱傷腎絡(luò)證與腎陰不足證的分析研究.pdf

1、目的:
　　通過代謝組學(xué)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)研究兒童紫癜性腎炎熱傷腎絡(luò)證與腎陰不足證尿液樣本代謝物，比較兩種證型物質(zhì)基礎(chǔ)，尋找紫癜性腎炎實證與虛證差異性代謝產(chǎn)物，對差異性代謝產(chǎn)物進行通路分析，探求兒童紫癜性腎炎中醫(yī)虛實證候可能存在的客觀性指標(biāo)。
　　方法:
　　采用氣相色譜-三重四級桿質(zhì)譜儀檢測兒童紫癜性腎炎熱傷腎絡(luò)證組（21例）、腎陰不足證組（19例）及正常健康兒童組（30例）尿液代謝產(chǎn)物，運用XCM

2、S在線數(shù)據(jù)處理，獲得化合物的相對峰面積，使用主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法，判別分析(OPLS-DA)對樣本數(shù)據(jù)進行多維統(tǒng)計學(xué)分析，篩選出各組潛在生物標(biāo)記物，運用MetaboAnalyst分析可能涉及的相關(guān)代謝通路綜合評價，闡釋兒童紫癜性腎炎證候分型的物質(zhì)基礎(chǔ)及可能的機制。
　　結(jié)果:
　　1.兒童紫癜性腎炎兩證型組與正常組在OPLS-DA中三組可以區(qū)分，其中OPLS-DA模型參數(shù)為R2Y=0.802，Q2=0.20

3、5。
　　2.紫癜性腎炎熱傷腎絡(luò)證組與正常組在OPLS-DA中可以明顯區(qū)分，模型參數(shù)為R2Y=0.922，Q2=0.342，根據(jù)VIP值大于1，篩選出14種內(nèi)源性化合物，分別為α-羥基異丁酸、羥基乙酸、丙酸、胱硫醚、L-蘇糖醇、赤蘚糖醇、L-丙氨酸、戊烯二酸、檸檬酸、3-(3-羥基苯基)-3-羥基丙酸、D-甘露醇、D-葡糖酸、N-α-乙酰-L-賴氨酸、鯊肌醇。
　　3.紫癜性腎炎腎陰不足證組與正常組在OPLS-DA中可明顯區(qū)

4、分，模型參數(shù)為R2Y=0.985，Q2=0.553，最終篩選出肌酐、1-氨基環(huán)丙烷羧酸、?；撬?、棕櫚酸、葡糖酸、馬尿酸、硬脂酸、纖維二糖、鯊肌醇9種內(nèi)源性代謝產(chǎn)物。
　　4.紫癜性腎炎熱傷腎絡(luò)證與腎陰不足證兩組在OPLS-DA中可明顯區(qū)分，模型參數(shù)為R2Y=0.972，Q2=0.566，最終鑒定出4種內(nèi)源性化合物，分別為:檸檬酸、6-氮胸腺嘧啶、纖維二糖、N-α-乙酰-L-賴氨酸。
　　討論:
　　1.與正常組比較，牛

5、磺酸在腎陰不足證組中呈下調(diào)趨勢;胱硫醚在熱傷腎絡(luò)證組呈上調(diào)趨勢;賴氨酸在熱傷腎絡(luò)證組呈下調(diào)趨勢;鯊肌醇在熱傷腎絡(luò)證組及腎陰不足證組均呈上調(diào)趨勢;檸檬酸在熱傷腎絡(luò)證組中呈下調(diào)趨勢。
　　2.與熱傷腎絡(luò)證組比較，賴氨酸、檸檬酸、6-氮胸腺嘧啶、纖維二糖在腎陰不足證中呈上調(diào)趨勢。
　　3.對所有代謝產(chǎn)物進行代謝通路分析，發(fā)現(xiàn)兒童紫癜性腎炎主要涉及的代謝通路為:氮代謝，半胱氨酸和蛋氨酸代謝，?；撬岷蛠喤；撬岽x，戊糖磷酸途徑，檸檬酸