NOP14對胰腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的調(diào)控作用及其相關(guān)分子機制和預后價值研究.pdf

1、腫瘤轉(zhuǎn)移是導致胰腺癌患者預后差的關(guān)鍵因素。p53突變體的富集可以促進腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移，然而，目前有關(guān)胰腺癌中突變型p53蛋白富集及相關(guān)信號通路持續(xù)活化的分子機制仍不清楚。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)核仁蛋白14(NOP14)在胰腺癌轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要功能，至今有關(guān)NOP14表達異常與惡性腫瘤發(fā)生及進展的關(guān)系鮮有報道。
　　本研究主要分為三個部分:功能研究篇首先利用免疫組織化學方法檢測了配對的胰腺導管腺癌原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移灶及癌旁組織中NOP14

2、的表達，進而在體外水平利用劃痕實驗、Transwell侵襲和遷移實驗研究NOP14對細胞運動能力的影響，并進一步在體內(nèi)水平通過建立胰腺癌小鼠皮下和原位移植瘤模型及尾靜脈注射模型系統(tǒng)探究NOP14在胰腺癌侵襲轉(zhuǎn)移中的功能。機制探索篇首先利用RNA-seq分析聯(lián)合qPCR驗證篩選和鑒定NOP14功能發(fā)揮的下游靶點，并進一步利用RNA穩(wěn)定性實驗、熒光素酶報告基因?qū)嶒灱叭旧|(zhì)免疫共沉淀實驗等深入闡釋NOP14、p53突變體、miR-17-5p和

3、P21等相關(guān)信號分子之間的調(diào)控作用，最終揭示NOP14介導胰腺癌轉(zhuǎn)移的分子機制。預后分析篇利用組織芯片探討了胰腺癌中NOP14表達與臨床病理參數(shù)之間的相關(guān)性及其預后價值。
　　功能研究發(fā)現(xiàn)NOP14在胰腺導管腺癌及其轉(zhuǎn)移灶中的表達水平明顯升高，上調(diào)NOP14表達促進了胰腺癌細胞侵襲和遷移，反之抑制其表達則導致細胞的侵襲和遷移明顯下降，體內(nèi)實驗結(jié)果亦表明NOP14是一種介導胰腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移的正調(diào)控因子。機制探索方面，證實miR-17

4、-5p/P21信號通路是介導NOP14功能發(fā)揮的下游分子，NOP14可以通過與p53突變體mRNA結(jié)合增強其穩(wěn)定性實現(xiàn)對下游miR-17-5p/P21信號通路的調(diào)控。預后分析表明NOP14高表達與胰腺癌局部侵襲和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，是胰腺癌患者預后不良的危險因素。
　　本研究闡釋了NOP14在p53突變驅(qū)動的胰腺癌轉(zhuǎn)移中的功能和分子機制，加深了對胰腺癌細胞中突變型p53蛋白富集及其相關(guān)信號通路持續(xù)活化機制的理解。靶向抑制NOP14