組蛋白乙酰化在NMDA受體依賴的情景恐懼記憶中的作用研究.pdf

1、N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA受體)在學習記憶過程中發(fā)揮著關鍵作用。近年來研究表明，組蛋白乙?；陂L時記憶的形成和鞏固中也起重要作用，并與NMDA受體密切相關。但是組蛋白乙?；谟洃浿械淖饔檬欠衽cNMDA受體的NR2B亞基有關，目前還不清楚。
　　 因此，本論文利用前腦NR2B過表達的轉(zhuǎn)基因小鼠，通過生化分析、westernblot和熒光定量PCR方法分別檢測條件性恐懼訓練前后的NR2B小鼠和對照小鼠海馬和皮層中組蛋白乙酰基

2、轉(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白去乙酰化酶(HDAC)活性變化、皮層中的組蛋白H3乙酰化水平的變化和ERK磷酸化的變化情況以及海馬和皮層中一些相關基因的mRNA的變化情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)無論是否給予條件性恐懼訓練，NR2B過表達對小鼠海馬和皮層的HAT和HDAC活性均無影響。但是，未給予訓練的NR2B轉(zhuǎn)基因小鼠皮層中的組蛋白H3乙酰化和磷酸化ERK水平均明顯高于野生型對照小鼠；而訓練后，兩組小鼠皮層中組蛋白H3乙?；綗o明顯差異。但是，兩種小鼠皮層

3、中的磷酸化ERK水平在訓練后均出現(xiàn)下降。此外，熒光定量PCR的結(jié)果表明，未受訓練的野生型小鼠皮層中BDNF、CREB1的表達水平明顯高于NR2B轉(zhuǎn)基因小鼠，而在訓練7天后NR2B小鼠海馬和皮層中的BDNF、海馬CREB1的表達水平顯著高于野生型小鼠。SYP基因在兩組小鼠海馬和皮層中的表達無差異，但是訓練后1小時和24小時后的海馬中，野生型小鼠高于NR2B小鼠，而在訓練后1小時的皮層中，NR2B小鼠高于野生型小鼠。而對NeuroD1表達無

4、影響。這提示NR2B過表達會對組蛋白乙酰化過程產(chǎn)生影響，但是對基因表達的影響很復雜，并且在不同的部位影響方式不同。
　　 為進一步確定組蛋白乙?；贜MDA受體依賴的記憶中的作用，將NR2B轉(zhuǎn)基因小鼠和對照小鼠分別給予HDAC抑制劑丁酸鈉處理1天和7天后，利用新物體識別和條件性恐懼訓練的行為學方法，檢測組蛋白去乙?；敢种苿R2B小鼠和對照小鼠記憶的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)給予HDAC抑制劑1天的處理對兩組小鼠的新物體再認記憶均無影響