對乙酰氨基酚致肝臟損傷的文獻計量學(xué)分析及AOP框架的構(gòu)建.pdf

1、目的:藥物性肝毒性(DILI)作為常見的藥源性疾病，是由藥物及其代謝產(chǎn)物引起的肝臟損傷，可病發(fā)于健康人群，也可病發(fā)在已患有嚴(yán)重肝病的患者中。隨著各種新藥的廣泛使用以及聯(lián)合用藥的增多，藥物性肝毒性的發(fā)生率也逐年增長。據(jù)不完全統(tǒng)計，目前已有1000多種藥物具有嚴(yán)重的肝臟毒性，這些藥物可引發(fā)多種肝臟疾病，例如肝細胞壞死、脂肪性肝炎、肝硬化等。肝臟是藥物代謝的重要器官，多數(shù)藥物在肝臟經(jīng)生物轉(zhuǎn)化排出，在此過程中，藥物及其代謝產(chǎn)物可以直接或間接造成

2、肝臟損傷。因此，藥物引發(fā)的肝臟損傷是制藥企業(yè)和臨床醫(yī)生都十分關(guān)注的問題。對乙酰氨基酚（APAP）作為臨床常用的解熱鎮(zhèn)痛藥物，在治療水平下是一種安全的藥物，過量服用后則會在人和動物體內(nèi)引發(fā)嚴(yán)重的肝臟損傷，已受到國內(nèi)外的廣泛關(guān)注。在美國，對乙酰氨基酚引發(fā)的肝臟損傷是急性肝衰竭（ALF）的最常見誘因，該藥物引發(fā)的肝臟損傷已成為研究熱點。在過去近50年中，對乙酰氨基酚引發(fā)的肝臟損傷取得了實質(zhì)性的研究進展，而在肝毒性的發(fā)生機制、防治措施等研究方面

3、并未達到一致性的共識。文獻計量學(xué)作為一門交叉學(xué)科，采用數(shù)學(xué)和統(tǒng)計學(xué)手段，定量地分析計量對象，包括文獻量（各種出版物，尤以期刊論文和引文居多）、作者數(shù)（個人集體或團體）、詞匯數(shù)（各種文獻標(biāo)示，主要以主題詞居多）等，可客觀、科學(xué)、全面地對整個研究領(lǐng)域和趨勢做定量分析，并為該領(lǐng)域的后續(xù)研究提供思路。有害結(jié)局路徑(AOP)的概念已逐漸被人們熟悉，用以描述已有知識關(guān)于一個直接的分子起始事件(MIE)與在生物不同組織層次水平（如細胞、器官、機體、群

4、體）所出現(xiàn)的與管理決策相關(guān)的終極有害效應(yīng)之間的因果聯(lián)系。也就是說，AOP就是一個從MIE到我們所關(guān)注的機體有害結(jié)局所發(fā)生的一系列連續(xù)事件。對乙酰氨基酚作為肝臟毒性的代表藥物，由于其致病機理相對清楚，實驗相關(guān)數(shù)據(jù)較為充足，為構(gòu)建對乙酰氨基酚引發(fā)肝臟損傷的AOP框架奠定了基礎(chǔ)。目前認(rèn)為，NAPQI與肝細胞內(nèi)生物大分子結(jié)合被認(rèn)為是啟動肝臟損傷的起始事件。鑒于肝臟損傷形成的分子網(wǎng)絡(luò)和通路的復(fù)雜性，單一的測試方法不能覆蓋AOP的全部機制，基于現(xiàn)有

5、的知識，應(yīng)用整合毒性測試策略和基于證據(jù)權(quán)重的原則，將體外-體內(nèi)的毒性測試策略相結(jié)合，可建立較全面的評價體系，來綜合評價對乙酰氨基酚引發(fā)的肝臟損傷。
　　方法:本研究第一章主要通過文獻計量學(xué)方法，探討對乙酰氨基酚致肝臟損傷的研究現(xiàn)狀及熱點。以醫(yī)學(xué)主題詞表(MeSH)制定檢索策略，檢索PubMed/MEDLINE數(shù)據(jù)庫，獲取對乙酰氨基酚致肝臟損傷的相關(guān)文獻，將題錄信息導(dǎo)入Thomson DataAnalyzer(TDA)軟件，對文獻中

6、的基本特征進行解析，采用可視化網(wǎng)絡(luò)圖展示作者間合作關(guān)系，并利用共詞分析及聚類分析等方法對高頻MeSH詞進行熱點分析。第二章基于文獻計量學(xué)的結(jié)果，進一步梳理、分析研究熱點，確定對乙酰氨基酚致肝臟損傷AOP框架中的分子起始事件(MIE)、關(guān)鍵事件(KEs)和不良結(jié)局(AO)，進而構(gòu)建對乙酰氨基酚引起肝臟損傷的AOP框架。采用Bradford Hill準(zhǔn)則對其進行證據(jù)權(quán)重評估，解答OECD提出的有關(guān)AOP可信性評價的關(guān)鍵問題，評估其可信度。<

7、br>　　結(jié)果與討論:根據(jù)檢索策略獲得文章1714篇，1966年～2015年發(fā)文數(shù)量隨年份呈增長趨勢;美國和英國刊發(fā)文章數(shù)量最多;《肝病學(xué)》(Hepatology)雜志刊登的文章數(shù)量最多，《柳葉刀》(Lancet)影響因子最高;Williams Roger是發(fā)文最多的作者，William M.Lee是各國作者間相互合作關(guān)系網(wǎng)絡(luò)中的中心人物。針對MeSH詞分類結(jié)果，最受關(guān)注的研究對象是男性群體，這可能由于男性易暴露酒精等因素，促使對乙酰氨

8、基酚產(chǎn)生致肝毒性極強的代謝產(chǎn)物;實驗常采用小鼠、大鼠和倉鼠等動物模型，Hep G2細胞、中性粒細胞和Kupffer細胞等體外模型也常用于探討機制的研究。在研究方法中，臨床上常用肝功能測試、植物療法和肝移植治療肝損傷;實驗室主要研究方法包括生物學(xué)標(biāo)記、免疫組織化學(xué)法、蛋白質(zhì)印跡法等;流行病調(diào)查則采用回顧性研究和前瞻性研究。在重要指標(biāo)中，判定各種反應(yīng)機制和結(jié)局等最常用的指標(biāo)涉及丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、膽紅素、

9、堿性磷酸酶、腫瘤破壞因子-α、丙二醛、活性氧(ROS)等。在損傷機制中，主要包括氧化應(yīng)激、脂質(zhì)過氧化反應(yīng)、藥物間相互作用和協(xié)同作用，生物轉(zhuǎn)化、氧化還原、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等，這些效應(yīng)特異性地發(fā)生在肝臟損傷的過程;在主要結(jié)局中，器官層面多關(guān)注急性肝衰竭、肝炎、肝再生等。
　　從1714篇文章中得到2702個MeSH詞，采用高頻低頻詞界分公式計算出的臨界詞頻(T)為51，得到詞頻≥51的高頻詞63個;對63×63共現(xiàn)頻率矩陣進行K-均值聚類分析

10、，將63個高頻詞聚類為6類，將反映的研究熱點相似的主題詞合并，整理之后得到3個研究熱點，即:對乙酰氨基酚的肝毒性機制研究、對乙酰氨基酚肝臟毒性保護作用的研究、對乙酰氨基酚致肝損傷的臨床治療及流行病學(xué)調(diào)查。
　　根據(jù)OECD提出的AOP構(gòu)建的指導(dǎo)原則，成功構(gòu)建并評價了對乙酰氨基酚引起肝損傷的AOP框架，包括分子作用:氧化應(yīng)激、脂質(zhì)過氧化、氧化還原、ROS生成等;毒性通路:c-JunN-terminalkinase(JNK)信號通路、

11、Keap l-Nrf2-ARE信號通路;細胞反應(yīng):細胞凋亡、壞死;器官反應(yīng):膽汁淤積、肝炎、肝衰竭、肝硬化。
　　結(jié)論:
　　1、采用TDA軟件，以PubMed/MEDLINE為數(shù)據(jù)庫來源，用標(biāo)準(zhǔn)MeSH詞制訂檢索策略的文獻計量學(xué)方法，在研究對象、結(jié)局變量、影響因素、研究設(shè)計/方法，研究內(nèi)容/機制、治療手段六方面，得出對乙酰氨基酚肝毒性的機制、保護作用及治療研究三個熱點。
　　2、初步構(gòu)建了對乙酰氨基酚致肝臟損傷AOP