他克莫司對(duì)激素耐藥型腎病綜合征患兒MDR1及其P-gp170表達(dá)的影響及意義.pdf

1、目的：檢測(cè)原發(fā)性腎病綜合征（INS）患兒不同時(shí)間點(diǎn)外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)多藥耐藥基因（MDR1）及其糖蛋白170（P-gp170）的表達(dá)情況，探討激素耐藥型腎病綜合征（SRNS）患兒加用他克莫司（TAC）治療后其MDR1及其P-gp170表達(dá)的變化和臨床意義。
　　方法：選擇本院住院的原發(fā)性腎病綜合征（INS）患兒36例為研究對(duì)象，根據(jù)激素治療效果分成兩組：激素敏感型腎病綜合征（SSNS）組20例和激素耐藥型腎病綜合征（SR

2、NS）組16例；20名健康體檢兒童作為正常對(duì)照組（control）。分四個(gè)時(shí)間點(diǎn)采集外周血標(biāo)本：（1）發(fā)病初未用糖皮質(zhì)激素（GC）時(shí)；（2）足量GC治療4周后；（3）SSNS組的GC減量4周后或SRNS組的加用TAC治療4周后；（4）SRNS組的加用TAC治療8周后。進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：①實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT－PCR）檢測(cè)SRNS和SSNS不同時(shí)間點(diǎn)PBMC MDR1mRNA的表達(dá)。②流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)SRNS和SSNS不

3、同時(shí)間點(diǎn)PBMC中淋巴細(xì)胞（Lymphocytes）上P-gp170的表達(dá)百分?jǐn)?shù)。③16例SRNS患兒均在激素治療4周后行腎穿刺活檢術(shù)，10例正常腎組織為正常腎組織對(duì)照組，用免疫組織化學(xué)方法(IHC)檢測(cè)腎組織中P-gp170的表達(dá)。
　　結(jié)果：（1）INS患兒PBMC MDR1mRNA與Lymphocytes P-gp170的表達(dá)呈高度正相關(guān)（r=0.854，P<0.01）。（2）GC治療前，INS患兒PBMC MDR1mRNA

4、與Lymphocytes P-gp170表達(dá)量均高于Control組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。（3）足量GC治療4周后，SSNS組和SRNS組患兒PBMC MDR1mRNA及Lymphocytes P-gp170的表達(dá)均較治療前明顯升高，差異均具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。（4）GC減量4周后，SSNS患兒MDR1mRNA及Lymphocytes P-gp170的表達(dá)較前明顯回落，差異均具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），而與GC

5、治療前無明顯差異性（P>0.05）。（5）加用TAC治療4、8周后，SRNS組患兒PBMC MDR1mRNA及Lymphocytes P-gp170的表達(dá)均較前明顯回落（P<0.01），而加用TAC治療4周后的SRNS患兒兩指標(biāo)的表達(dá)量明顯高于GC減量4周后的SSNS患兒（P<0.01）。（6）在SRNS組中，TAC治療8周后PBMC MDR1mRNA及Lymphocytes P-gp170的表達(dá)量明顯低于4周后（P<0.01），且與G

6、C治療前相比，無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。（7）SRNS患兒與正常腎組織對(duì)照組兒童腎組織中P-gp170主要表達(dá)于腎小管及腎間質(zhì)，SRNS組腎組織近曲小管和遠(yuǎn)曲小管的P-gp170陽性率表達(dá)均明顯高于正常腎組織對(duì)照組（P<0.01），SRNS組內(nèi)近曲小管P-gp170陽性率表達(dá)明顯高于遠(yuǎn)曲小管(P<0.01)。（8）足量GC治療4周后，SRNS患兒Lymphocytes P-gp170的表達(dá)量與腎組織近曲小管及遠(yuǎn)曲小管P-gp17

7、0的表達(dá)量均呈正相關(guān)（r=0.547，P<0.05；r=0.541，P<0.05）。（9）GC治療前，SRNS組患兒PBMC P-gp170的表達(dá)量與24小時(shí)尿蛋白定量正相關(guān)(r=0.712，P<0.01)。
　　結(jié)論：（1）原發(fā)性腎病綜合征患兒PBMC MDR1mRNA與Lymphocytes P-gp170的表達(dá)呈高度正相關(guān)，即MDR1mRNA表達(dá)量越高，其蛋白產(chǎn)物P-gp170表達(dá)量越高；（2）激素耐藥型腎病綜合征（SRNS