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1、殺菌劑1,2-苯并異噻唑啉-3-酮(BIT)對(duì)細(xì)菌、真菌等微生物有突出的抑制作用,具有低毒、高效、水溶性好等優(yōu)點(diǎn),因而廣泛應(yīng)用于工業(yè)殺菌防腐。那么BIT開發(fā)作為新型農(nóng)藥時(shí),其對(duì)農(nóng)業(yè)微生物特別是灰霉菌的抑菌效果如何?作用機(jī)理又是什么呢?本文以灰霉菌作為作用靶標(biāo),采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定了BIT對(duì)灰霉菌抑制作用,并通過BIT處理后菌絲顯微結(jié)構(gòu)的觀察以及菌體細(xì)胞細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞核三個(gè)層次的生理生化指標(biāo)的測(cè)定,對(duì)BIT的作用機(jī)理進(jìn)行了研究。實(shí)
2、驗(yàn)結(jié)果如下:
⑴BIT對(duì)灰霉菌表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制作用,通過實(shí)驗(yàn)測(cè)得抑制中濃度(EC50)值為69.95μg·mL-1。
⑵經(jīng)過BIT處理后的灰霉菌在透射電鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)破壞,同時(shí)測(cè)得幾丁質(zhì)含量的下降,說明BIT作用后導(dǎo)致菌體細(xì)胞壁中幾丁質(zhì)結(jié)構(gòu)的破壞。
⑶BIT處理后,測(cè)得灰霉菌菌絲的電導(dǎo)率逐漸增大,溶液中可溶性蛋白以及可溶性糖的滲漏量增加,表明BIT改變了菌體細(xì)胞膜的通透性,導(dǎo)致內(nèi)含物的
3、滲漏。
⑷實(shí)驗(yàn)對(duì)β-1,3葡聚糖合成酶、幾丁質(zhì)酶進(jìn)行活性測(cè)定,發(fā)現(xiàn)BIT作用后幾丁質(zhì)酶活性增強(qiáng),而β-1,3葡聚糖合成酶活性降低,這會(huì)引起葡聚糖合成受阻、幾丁質(zhì)加速分解,揭示了菌體細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)破壞的原因。
⑸實(shí)驗(yàn)對(duì)過氧化氫酶進(jìn)行活性測(cè)定,發(fā)現(xiàn)過氧化氫酶活性下降,導(dǎo)致解毒作用降低,影響細(xì)胞的能量代謝活動(dòng),這一點(diǎn)與工業(yè)殺菌機(jī)理研究具有一致性。
⑹不同濃度BIT分別作用于灰霉菌后進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn),
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