益腎活血丸改善子宮內(nèi)膜容受性局部分子調(diào)控機制的研究.pdf

1、目的:
　　通過檢測腎虛血瘀型PCOS患者子宮內(nèi)膜中HOXA10、HOXA11、Wnt7a、LIF、整合素β3的表達量，從分子水平探討子宮內(nèi)膜容受性的建立機制，和經(jīng)典Wnt/β-catenin信號通路調(diào)控子宮內(nèi)膜容受性可能的下游靶基因以及益腎活血丸改善子宮內(nèi)膜容受性的作用機理，為該藥在臨床上的應(yīng)用提供理論研究基礎(chǔ)。
　　方法:
　　病例選取于2014年1月～2014年12月就診于廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科門診，經(jīng)中

2、醫(yī)辨證屬腎虛血瘀型的PCOS患者，排除治療期間丟失例數(shù)、妊娠例數(shù)、未排卵例數(shù)及取子宮內(nèi)膜量過少的例數(shù)，試驗組實取內(nèi)膜25例，對照組實取內(nèi)膜23例，試驗組中完成前后自身對照10例，對照組中完成前后自身對照8例。每組隨機選取12例患者做前后自身對照，于治療前排卵后7-10天，測量子宮內(nèi)膜厚度，排除懷孕后刮取少量子宮內(nèi)膜。試驗組于月經(jīng)周期第5天服克羅米芬50mg/d，連服5天，同時口服益腎活血丸6g，tid，至下次月經(jīng)來潮，連用3個周期。對照

3、組:于月經(jīng)周期第5天服克羅米芬50mg/d，連服5天，同時服用腸溶阿斯匹林片75 mg/d至排卵日停服，月經(jīng)周期第10天加服補佳樂1 mg/d，連服10天停藥，連用3個周期。所有患者均彩超監(jiān)測排卵，待排卵后7-10天，測量子宮內(nèi)膜厚度，排除妊娠后刮取子宮內(nèi)膜，用半定量RT-PCR、免疫組化法及western-blot法分別測定子宮內(nèi)膜中HOXA10、HOXA11、Wnt7a、LIF、整合素β3的表達量，計算兩組患者治療期間妊娠率，并對H

4、OXA10、HOXA11與Wnt7a相關(guān)性以及HOXA10、Wnt7a、LIF、整合素β3與子宮內(nèi)膜厚度進行相關(guān)性研究，其結(jié)果用統(tǒng)計軟件SPSS17.0進行統(tǒng)計分析。
　　結(jié)果:
　　PCR、western-blot、IHC三種方法檢測結(jié)果一致:
　　1、HOXA10的表達:試驗組與對照組PCOS患者經(jīng)治療后子宮內(nèi)膜中HOXA10表達量均較治療前明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。治療后兩組間HOXA10表達量比較前者稍高于后

5、者，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2、HOXA11的表達:試驗組與對照組PCOS患者經(jīng)治療后子宮內(nèi)膜中HOXA11表達量均較治療前明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。治療后兩組間HOXA11表達量比較前者稍高于后者，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3、Wnt7a的表達:試驗組與對照組PCOS患者經(jīng)治療后子宮內(nèi)膜中Wnt7a表達量均較治療前明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。治療后兩組間Wnt7a表達量比較前者明顯高于后者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　4

6、、LIF的表達:試驗組與對照組PCOS患者經(jīng)治療后子宮內(nèi)膜中LIF表達量較治療前稍升高，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。治療后兩組間LIF表達量比較前者稍高于后者，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　5、整合素β3的表達:試驗組與對照組PCOS患者經(jīng)治療后子宮內(nèi)膜中整合素β3表達量均較治療前明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。治療后兩組間整合素β3表達量比較前者稍低于后者，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　6、HOXA10與Wnt7a的相關(guān)性分析:相關(guān)系數(shù)r＞0.8，

7、P＜0.05，兩者有顯著相關(guān)性.
　　7、HOXA11與Wnt7a的相關(guān)性分析:相關(guān)系數(shù)r＞0.8，P＜0.05，兩者有顯著相關(guān)性.
　　8、分別做HOXA10、Wnt7a、LIF、整合素β3與子宮內(nèi)膜厚度相關(guān)性分析結(jié)果提示均未見相關(guān)性。
　　結(jié)論:
　　1、從形態(tài)學(xué)角度評價子宮內(nèi)膜容受性時，綜合子宮內(nèi)膜厚度、內(nèi)膜類型、內(nèi)膜腺體、間質(zhì)細(xì)胞及血流情況等指標(biāo)結(jié)果更有意義。
　　2、人的子宮內(nèi)膜中HOXA11可能

8、與HOXA10一樣參與了子宮內(nèi)膜容受性的建立。
　　3、人的子宮內(nèi)膜中Wnt7a和HOXA10表達量呈高度正相關(guān)性，Wnt7a和HOXA11表達量亦呈高度正相關(guān)性，推測Wnt7a可能通過經(jīng)典Wnt/β-catenin信號通路，調(diào)控下游靶基因HOXA10、HOXA11的表達影響子宮內(nèi)膜容受性。
　　4、中成藥益腎活血丸與西醫(yī)補佳樂聯(lián)合阿司匹林均可能通過提高腎虛血瘀型PCOS患者子宮內(nèi)膜中HOXA10、HOXA11、Wnt7a、