重組人IL-17D對上皮性卵巢癌SKOV3細胞增殖、遷移及VEGF-C表達的影響.pdf

1、目的：通過研究重組人IL-17D（r-hIL-17D）對人上皮性卵巢癌SKOV3細胞增殖、遷移及VEGF-C表達的影響，探討IL-17D對卵巢癌增殖及淋巴轉(zhuǎn)移的作用。
　　方法：
　　1.體外培養(yǎng) SKOV3（人卵巢漿液性乳頭狀腺癌細胞）并連續(xù)傳代，于倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)。
　　2.取對數(shù)生長期的SKOV3細胞，分別以不同濃度（0ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml） r-hIL-17

2、D作用于細胞0h、24h、48h、72h、96h、120h，以MTS法檢測不同濃度r-hIL-17D在不同時間對卵巢癌SKOV3細胞的增殖的影響，并繪制生長曲線。
　　3.Transwell小室實驗檢測不同濃度r-hIL-17D(0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml)對SKOV3細胞遷移能力的影響。
　　4.分別以不同濃度（0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/m

3、l） r-hIL-17D作用SKOV3細胞48h后，提取各組細胞RNA，以RT-qPCR法檢測不同濃度r-hIL-17D對SKOV3細胞VEGF-C mRNA表達的影響。
　　5.分別以不同濃度（0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml） r-hIL-17D作用 SKOV3細胞48h后，收集細胞上清液，ELISA法檢測上清液中VEGF-C的含量。
　　結(jié)果：
　　1.成功培養(yǎng)并傳代卵巢癌S

4、KOV3細胞，獲得對數(shù)生長期細胞。
　　2.MTS法顯示：10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細胞增殖速度快于0ng/ml組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細胞增殖速度快于10ng/ml組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細胞增殖速度無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　3.Transwell小室

5、實驗顯示：在不同濃度IL-17D(0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml)作用下，SKOV3細胞的遷移數(shù)目分別為118.80±13.66、144.20±12.70、180.80±20.54、176.60±18.15，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。兩兩比較，10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細胞的遷移能力強于0 ng/ml組（P＜0.05），50 ng/

6、ml、100 ng/ml組SKOV3細胞的遷移能力強于10 ng/ml組（P＜0.05），50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細胞的遷移能力無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。
　　4.RT-qPCR結(jié)果顯示：在不同濃度r-hIL-17D（0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml）作用下，SKOV3細胞VEGF-C mRNA相對表達量分別為1.00±0.18、1.54±0.22、2.26±0.1

7、8、2.11±0.26，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。兩兩比較，10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml組VEGF-C mRNA表達量高于0 ng/ml組（P＜0.05）,50 ng/ml、100 ng/ml組VEGF-C mRNA表達量高于10 ng/ml組細胞（P＜0.05）。50 ng/ml、100 ng/ml組VEGF-C mRNA表達量差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　5.ELI

8、SA結(jié)果顯示：不同濃度（0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml）組細胞上清液中 VEGF-C的含量分別為4095.09±105.25ng/ml、4439.84±133.87 ng/ml、4755.66±64.24 ng/ml、4646.59±111.92 ng/ml，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。兩兩比較，10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml組VEGF-C含量高于0